农杆菌介导大豆成熟子叶节遗传转化及转录因子gmptf1在大豆中的表达.pdfVIP

中文摘要 以冀豆12的未成熟种子作为外植体，研究了6．BA浓度、取材时间、发育 程度对不定芽诱导的影响。试验结果表明，大豆未成熟胚子叶节的最优再生条件 是当豆荚种子发育到最大(开花后60．66d)，豆荚开始由绿变黄时，在6一BA浓 度在1．0～1．5mg／L条件诱导下，出芽率最高，达到了96．67％一100％，子叫‘节平均 出芽数为1．6~2．57个。 以冀豆7的未成熟子叶节为外植体做遗传转化研究，探讨了外植体的低温预 处理、共培养温度、共培养基pH值对转化效率的影响。结果表明，在开花60d 左右，籽粒发育到最大，产生的抗性芽较多；对外植体4℃预处理降低了抗性芽 数；共培养温度为24℃、培养基pH值为6．6和24h光照条件下抗性芽产生率高。 豫豆22、冀豆7、品系12的平均抗性芽数较高，到达2．11．2．18个。 利用根癌农杆菌介导大豆子叶节遗传转化法将转录因子基因G聊P刑导入 大豆品种豫豆22，得到了11个T1代的G聊P阿J转基因株系。通过荧光定量PCR 检测G聊尸刑在转基因植株的表达以及测定转基因植株和未转基因植株在低磷 胁迫条件下的形态和生理生化表现差异，分析G聊P刑基因在导入大豆后发挥 的生物学功能。结果表明：转基因植株的G珑P删表达量明显高于未转基因对 照大豆，其中以TI．32和T1．40为最高。在低磷胁迫下，转基因大豆的根系长度、 根表面积、根体积、叶面积、光合色素含量、磷吸收速度及叶片磷含量都显著高 于未转基因对大豆，而丙二醛含量显著低于未转基因大豆，表明转基因植株的耐 低磷能力要优于未转基因大豆。 关键词：大豆；未成熟种子子叶节；转化；转录因子；G聊尸硎；耐低磷 II Abstract Immatureseedsot。Jidou12were as m used ordertoresearchthe explants impact of6-BA tirllea11dthe of onadVentitious concemration，samplillg degreedeVelopmem budsiIlduction．Theresultsshowedthat the conditionsofthe optiIllalregeneration i工I】mature sectionwasthe seed soybean cotyledolls pod toturn i11 nowering60-66d)，when w．When协ducedthecondition podsbegan yello that 6-BAconcentrationwas ratereachedto96．67％～1 1．0～1．5mg／L，budding 00％， andthe amountwas1．6～2．57． aVeragebuddillg Immature nodeofJidou7wereusedas toreserachthe cotyledons explants ofthe ofthe impact low—tenlperaturepretreat