一株产纤维素酶菌的筛选、鉴定及代谢产物的研究.pdfVIP

fIIIII I PII IIIIII I II II㈠ 摘要 随着全世界人口的增长和社会经济水平的不断提高，能源危机、环境污染等问题， 正日益严重地困扰着整个世界，因此，寻找开发新能源、降低环境污染显得越来越重要。 玉米秸秆是纤维素组分含量很高的农作物残留物，如何使玉米秸秆无害化、资源化已经 成为国内外研究的热点。利用微生物产生的纤维素酶水解秸秆，具有效果稳定及污染少 等优点。因此，筛选和分离出高产纤维素酶的微生物种类，研究其对纤维素物质的降解 能力，对减轻农业废弃物给环境的压力和纤维素资源的开发利用具有重要的意义。 菌种来源于东北地区林杨腐木土样，玉米秸秆腐殖物，河道沟渠内土样，从中分离 筛选出具有降解纤维素能力的微生物。经初筛后获得19株能够利用羧甲基纤维素作为唯 一碳源生长的菌株，通过复筛比较菌株产生的透明圈，获得12株产生明显透明圈的菌株， 同时测定菌株的滤纸酶活力，结合透明圈对比结果，最终选择菌株C5作为目标菌株做进 一步研究。经形态学和生理生化特性初步鉴定菌株为半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛 8S rDNA鉴定， 梗孢科，青霉属(Penicillium．sp)，运用分子生物学分析方法对菌株进行1 对菌株C5的ITS序列分析比较，确定菌株为斜卧青霉(Penicilliumdecumbens)C5。 对斜卧青霉(Penicillium 最高为7．085 IU／mL、2．681IU／mL和1．487 (Ij-Gase)最高值分别为3．856 IU／mL；测定酶活结束后，将 培养基过滤、风干，取过滤物进行扫描电镜成像，分析秸秆样品物理形变，确定菌株对 秸秆纤维素作用的强弱。斜卧青霉(Penicillium 酶系，对玉米秸秆纤维素也有较好的降解能力。 通过GC．MS对发酵过程的代谢产物分析，斜卧青霉(Penicillium 玉米秸秆纤维素主要的代谢产物为乙酸异丁酯、苯甲酸乙酯、戊醇、乙酸异丙酯、乳酸 甲酯；同时，推测存在的代谢途径为，乙酸异丁酯末端的碳原子断裂后生成了乙酸异丙 酯，乙酸异丙酯发生了脱羧反应生成了戊醇。 rDNA；纤维素酶； 关键词：秸秆纤维素；资源化；斜卧青霉(Penicilliumdecumbens)；18S 代谢产物 Abstract Abstract With and the ofworld ofsocialeconomic are growth populationimprovement level，there asthe crisisandenvironmentaland SO manyproblems，suchenergy pollutionon，seriously whole becomesmoreand the world．Therefore，it more to new perplexing importantdevelop straw to has ar