核苷酸抗氧化作及其对小鼠相关基因表达的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 核苷酸通常被认为是一种条件型营养素，在特定的条件下发挥重要作用。本研究旨 在探讨其本身可能存在的清除自由基的能力及其抗氧化特性，进一步揭示核苷酸的作用 机制，扩大核苷酸应用的理论和实践基础。 本试验采用化学比色法测定四种核苷酸清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子 自由基的能力；采用流动注射化学发光法建立了评价四种核苷酸(5’．AMP、5-CMP、 超氧离子自由基能诱导增强鲁米诺化学发光，核苷酸对超氧阴离子自由基可能具有清除 作用，因而，在鲁米诺发光体系中加入核苷酸可能会抑制鲁米诺化学发光；建立H202 氧化损伤体外培养脾细胞和肝细胞的模型，用MTT法检测核苷酸的修复作用，并分析了 其对细胞抗氧化体系及抗氧化能力的影响；同时采用断奶后的雄性小鼠，分别饲喂添加 DNA， 0、0．25％核苷酸水平的基础同粮15天，对照组灌胃生理盐水，实验组灌胃CpG 4h后比较基因表达的差异，借用基因芯片技术，对核苷酸抗氧化作用的相关基因进行了 研究。 试验结果表明，核苷酸具有剂量依赖性的体外抗氧化和清除活性氧能力，核苷酸的 清除能力比较弱。四种核苷酸均能有效的抑制化学发光反应，并且随着核苷酸浓度的升 高，抑制率增强。细胞体外培养试验结果表明，添加核苷酸均能修复H202诱导的脾细胞 氧化损伤，修复作用与浓度呈正比，浓度达到一定高度时修复均显著(氏O．01)，能显著 损细胞的培养液中添加核苷酸能使其细胞培养液的氧自由基(ROS)水平逐渐降低，核 苷酸添加量为10mmol／L时，ROS水平接近对照组水平，说明其具有显著的抗氧化作用。 DNA束I]激导致小鼠的物质能量代谢、抗氧化酶类等基因表达上 Affymetrix芯片显示CpG 调，而日粮中添加核苷酸可以相对下调抗氧化酶类基因的表达，却相对上调了DNA损伤 修复等基因的表达。 从以上试验结果可以看出，核苷酸具有较强的清除自由基的抗氧化能力。其可能通 过清除小鼠的氧化损伤产生的自由基，从而改变体内自由基的含量，保护机体免受氧化 损伤。 关键词：核苷酸；抗氧化剂；自由基；细胞培养；基因芯片；小鼠 Abstract Abstract was asa Nucleotide consideredkindofconditionalbasicnutrients．It always produced beneficialeffects several benot a times．However，it important during special may only conditional alsoanaturalantioxidant．Inthis advancedmethods nutrient，but study，several wereusedto antioxidanteffectsof revealits mechanismof study nucleofide，topossible action．T11iSwill abasisforfurther oftheuseofnucleotideinscientific． provide develop Inthis of free free paper，scavenginghydroxylradical(。OH)，D