原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
中国农业科学 ， （）：
2003 36 4 398 - 402
Scientia Agricultura Sinica
PCR-RFLP 筛选 DNA 文库克隆Bt cry 基因的研究
，
1 1 1 1 1 1 2
陈中义 ，吴 限 ，张 杰 ，宋福平 ，管 宇 ，黄大 方
日
1 2
（中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100094 ； 中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081）
摘要： 菌株 对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力， 鉴定含有 、 、 和未
Bt C002 PCR-RFLP cr 1A a cr 2A b cr 1Ca
y y y
知杀虫蛋白基因cryX 等，其中cry1Ca 位于染色体DNA 6 ～ 9 kb 的EcoR I 片段。染色体和质粒DNA 分别经EcoR
I 完全酶切和Sau3A I 部分酶切、电泳回收6 ～ 9 kb 片段。E . coli-Bt 穿梭载体pHT315 分别与目的DNA 连接、转化
大肠杆菌感受态细胞后获得了相应的 文库。约 个转化子合为一个转化子池，采用 方法快速检
DNA 50 PCR-RFLP
测，分别从约 质粒 文库转化子和 个染色体文库转化子中筛选获得了 、 、 和未
2 000 DNA 400 cr 1A a cr 2A b cr 1Ca
y y y
知基因cr X 的阳性克隆，相应命名为 HT- 1Aa、HT- 1Ca、HT-2Ab 和 HT-X 。限制酶切分析表明，含有 cr 1A a 、
y p p p p y
和 基因的克隆片段均含有相应基因的保守物理图谱。进一步将这些质粒分别导入 无晶体突变
cr 1Ca cr 2A b
文档评论（0）