菜豆毒性分析及毒性预测模型建立.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(4):727-734 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.04.10 菜豆毒性分析及毒性预测模型建立 李佳楠，杨 薇，彭 娜，陈禅友 （江汉大学生命科学学院生物技术系，武汉 430056 ） 摘要：【目的】从细胞水平分析不同品种菜豆对小鼠细胞的毒性，建立菜豆毒性预测模型，为菜豆低毒品种 选育提供依据。【方法】选取已测定抗营养因子含量的 27 个品种的菜豆，通过匀浆、离心、超滤浓缩制备菜豆浸 提液。分离小鼠脾脏淋巴细胞，利用MTS 法分析菜豆浸提液对小鼠淋巴细胞存活率的影响。结合27个菜豆品种的 抗营养因子含量，以小鼠细胞生长影响率为依变量，抗营养因子含量为自变量，SPSS软件强行进入4个变量，得 到多元回归方程，并经逐步回归分析，最终得到一元回归方程，从而建立菜豆毒性预测模型。以小鼠进行急性毒 性试验，验证菜豆毒性预测模型的可行性：选择高、中、低 3 个毒性等级共 6 个菜豆品种，采用经口灌胃的方式 处理小鼠，以灌胃菜豆浸提液的小鼠为试验组，灌胃生理盐水的小鼠为阴性对照组，灌胃菜豆植物凝集素标准品 的小鼠为阳性对照组，观察各组小鼠死亡情况，统计一周内小鼠死亡率，解剖观察各组小鼠脏器改变，并取各组 小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胃、小肠等器官组织制备病理切片，经HE染色后于倒置显微镜下进行病理分析。【结果】 MTS检测结果显示，27个菜豆品种的浸提液对小鼠淋巴细胞生长均有不同程度影响，影响率最低为13.77%，最高 为85.23%，且不同菜豆品种浸提液对小鼠淋巴细胞影响率差异显著；此外，菜豆植物凝集素的含量是菜豆浸提液 对 小 鼠 淋 巴 细 胞 生 长 的 主 要 影 响 因 素 。 结 合 抗 营 养 因 子 含 量 测 定 结 果 ， 得 到 多 元 回 归 方 程 Y=-20.88+4.902X +0.258X -3.506X +18.298X ，经逐步回归分析，最终得到一元回归方程Y=30.837+4.5X ，建立了 1 2 3 4 1 菜豆毒性预测模型。小鼠急性毒性试验结果表明，菜豆浸提液对小鼠一周内致死率与其对小鼠淋巴细胞生长影响 率呈正相关，高温灭活后的致死试验表明菜豆鲜荚的主要致死成分为蛋白类物质。灌胃后的试验组小鼠在生理行 为表现上与阳性对照组小鼠一致，均呈现行动迟缓、皮毛暗淡无光、眼微睁无神、食欲减退、轻微腹泻症状。解 剖小鼠发现试验组与阳性对照组小鼠肝脏发白或伴有淤血点，脾脏肿大、肠胃水肿、薄膜紧张、肾脏水肿。病理 分析表明试验组小鼠与阳性对照组小鼠各脏器的组织细胞均有病理改变，主要表现为局部水肿充血、炎性浸润以 及部分细胞坏死，小鼠急性毒性试验结果说明，建立的菜豆毒性预测模型可用于菜豆毒性水平预测。【结论】建立 了菜豆毒性预测模型，通过动物实验验证了其可行性，为从大量样本中选育低毒菜豆品种提供了依据和方法。 关键词：菜豆；抗营养因子；细胞毒性；毒性评价；预测模型；小鼠 Toxicity Analysis of Kidney Bean and Construction of Its Prediction Model LI Jia-nan, YANG Wei, PENG Na, CHEN Chan-you (Department of Biotechnology, Jianghan University, Wuhan 430056) Abstract: 【Objective 】 The objective of this study is to analyze the toxicity of varieties of kidney beans in