氮素对灌浆期夏玉米叶片蛋白质表达的调控.pdfVIP

氮素对灌浆期夏玉米叶片蛋白质表达的调控.pdf

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中国农业科学 2015,48(9):1727-1736 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.09.06 氮素对灌浆期夏玉米叶片蛋白质表达的调控 王祥宇,魏珊珊,董树亭,刘 鹏,张吉旺,赵 斌 (山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安 271018 ) 摘要:【目的】在大田生产条件下研究氮素对灌浆期玉米叶片蛋白质表达的调控。【方法】在大田生产条件下, 以紧凑耐密型玉米杂交种登海618为试验材料,研究施氮对玉米穗位叶花后净光合速率、硝酸还原酶(NR)活性、 超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量和可溶性蛋白含量的影响。采用TCA- 丙酮沉淀法提取灌浆期(花后20 d)两个施氮处理下玉米穗位叶总蛋白质,并用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离 获得蛋白质图谱。采用ImageMaster-2D Elite 7.0图像分析软件对蛋白质图谱进行比较,确定玉米叶片应答灌浆 期施氮处理的差异蛋白点。通过 MALDI-TOF/TOF MS 质谱分析及 NCBInr 数据库搜索,对差异表达蛋白质进行鉴定 并分析其涉及的生物学功能。【结果】开花后,随生育进程的推进,玉米穗位叶净光合速率、叶绿素含量、NR、SOD 和 POD 活性及可溶性蛋白含量均呈下降趋势,而 MDA 含量则呈上升趋势。相对于不施氮处理,施氮处理下叶片叶 绿素含量、NR、SOD 和 POD 活性及可溶性蛋白含量均显著提高,而 MDA 含量则显著下降。对灌浆期玉米叶片进行 双向电泳及图谱分析,分别在施氮和不施氮条件下检测出 1 086 和 1 170 个蛋白点。通过图像分析软件进行成对 匹配分析,共得到29个显著差异蛋白点。经质谱鉴定分析,29个显著差异蛋白点中有25个被成功鉴定,鉴定成 功的蛋白中除未知蛋白(蛋白点55)和30s核糖体蛋白(蛋白点1089)外,其余蛋白表达量均在施氮条件下上调。 通过搜索NCBInr数据库,差异表达的蛋白主要分为8类,包括13个能量相关蛋白,2个防御相关蛋白,2个蛋白 合成相关蛋白,2 个蛋白目的和储存相关蛋白,1 个细胞生长相关蛋白,1 个次级代谢相关蛋白,1 个转运相关蛋 白和3个未知蛋白。【结论】施氮对灌浆期玉米叶片光合能力、碳代谢能力、防御能力、蛋白合成能力、蛋白目的 和储存能力、以及次级代谢能力等均有显著提升作用。 关键词:氮素;夏玉米;穗位叶;差异蛋白质组学;灌浆期 Regulation of Nitrogen on Protein Expression of Summer Maize (Zea mays L.) Leaves at Filling Stage WANG Xiang-yu, WEI Shan-shan, DONG Shu-ting, LIU Peng, ZHANG Ji-wang, ZHAO Bin (College of Agriculture, Shandong Agricultural University/Key Laboratory of Crop Biology of China, Taian 271018, Shandong) Abstract: 【Objective 】The objective of this experiment is to explore the regulating effect of nitrogen on protein expression of leaf of summer maize under the field production condition. 【Method 】Denghai 618 was selected as an experimental material, different nitrogen treatments were designed to investigate the photosynthetic rate, the activity of n

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