多粘类芽孢杆菌CP7β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及应用.pdfVIP

中国农业科学 2010,43(22):4614-4623 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.22.008 多粘类芽孢杆菌CP7β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶 基因的克隆、表达及应用 1,2 1 1 1 文凤云 ，廖富蘋 ，林健荣 ，钟杨生 1 2 ( 华南农业大学动物科学学院，广州 510642 ； 河南科技大学动物科技学院，河南洛阳 471003 ） 摘要：【目的】克隆多粘类芽孢杆菌（ Paenibaccillus polymyxa ）CP7的β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶基因，构建 高效表达工程菌株，为 CP7 菌的抗菌活性组分研究和开发利用以及葡聚糖酶在农业生产中的应用提供理论依据。 【方法】通过CP7菌β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶基因的克隆及原核表达构建工程菌株，采用平板对峙培养和生长速率 测定法研究重组酶对供试真菌的生长抑制活性，同时采用体外消化法研究该酶对麦类饲料消化率的影响。【结果】 成功克隆目的基因并在原核系统获得高效表达。重组酶蛋白对 4 种供试真菌菌丝生长具有明显抑制作用，平均抑 制率高达40%以上；添加了重组β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶的处理组样品，经体外消化后黏度降低了4.69%（ P ﹥0.05）。 【结论】β-1, 3-1, 4-葡聚糖酶是CP7菌发酵液中抗真菌活性组分或其中之一，对真菌生长抑制的活性作用提示 其可作为农业抗病虫害新型药物进行开发研究；该酶能够有效降低麦类饲料黏度，表明其作为饲料添加剂的开发 利用同样具有良好前景。 关键词：多粘类芽孢杆菌CP7；葡聚糖酶；基因克隆表达；麦类饲料 Cloning, Expression and Application of β-1,3-1,4-glucanase Gene from Paenibaccillus polymyxa CP7 1,2 1 1 1 WEN Feng-yun , LIAO Fu-pin , LIN Jian-rong , ZHONG Yang-sheng 1 2 ( College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; College of Animal Science and Technology, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, Henan) Abstract ：【Objective 】This study was carried out to obtain high-yielding