二花脸猪Smad4基因的克隆与卵巢组织mRNA的表达水平.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(23):4883-4890 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.23.015 二花脸猪Smad4 基因的克隆与卵巢组织mRNA 的表达水平 赵永祥, 刘吉英, 潘增祥, 张久峰, 姚 勇, 周吉隆, 谢 庄, 徐银学, 刘红林, 李齐发 （南京农业大学动物科技学院，南京210095 ） 摘要：【目的】了解二花脸猪Smad4 （common-mediator Sma4 ）基因的序列特征和组织表达特征，分析二 花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4 基因mRNA 表达水平的差异。【方法】采用克隆测序技术获得二花脸猪Smad4 基因 cDNA 序列，利用生物信息学方法分析二花脸猪 Smad4 基因的序列特征和蛋白的理化性质、高级结构， RT-PCR 检测其组织表达特征，并采用real-time PCR 技术检测二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4 基因mRNA 的表达水平。【结果】二花脸猪Smad4 基因编码区序列全长 1 659 bp，编码一个含有552 个氨基酸残基的蛋 白质，氨基酸序列与其它哺乳动物的同源性均在98%以上；二花脸猪Smad4 也包括3 个典型的结构域（MH1、 SAD 和MH2 ）。二花脸猪Smad4 基因在所检测的组织中均有表达，且卵巢组织中mRNA 的表达水平极显著高于 商品猪（P＜0.01）。【结论】二花脸猪Smad4 基因可能拥有其它哺乳动物Smad4 基因相同的功能及其可能与 猪高繁殖力间有一定相关。 关键词：二花脸猪; Smad4; 卵巢组织; 表达水平 Cloning and mRNA Expression of Smad4 Gene in Ovaries of Erhualian Pig ZHAO Yong-xiang, LIU Ji-ying, PAN Zeng-xiang, ZHANG Jiu-feng, YAO Yong， ZHOU Ji-long, XIE Zhuang, XU Yin-xue, LIU Hong-lin, LI Qi-fa (College of Animal Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095) Abstract: 【Objective 】To investigate The sequence features and tissue distribution patterns of Smad4 gene in Erhualian pigs were investigated, and the Smad4 mRNA expression differences in ovarian tissue between Erhualian and commercial cross pigs were analyzed. 【Method 】The cDNA sequence of Smad4 gene was obtained by cloning and sequencing techniques in Erhualian pigs, the gene sequence characteristics, physical and chemical properties and the 3D structure of Smad4 protein were analyzed by using bioinformatics methods. The tissue distribution patterns of Smad4 gene were detected by RT-PCR, and then the mRNA expression levels were detected in o