两个小麦LEA基因的特征及其对非生物胁迫的响应.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(19):3736-3745 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.19.002 两个小麦LEA基因的特征及其对非生物胁迫的响应 1 2 1 1 1 1 1 1 刘露露 ，陈 雷 ，张春艳 ，石瑞杰 ，任江萍 ，孟凡荣 ，尹 钧 ，李永春 1 2 （河南农业大学国家小麦工程技术研究中心，郑州 450002 ； 河南省商丘市农林科学院，河南商丘 476000 ） 摘要：【目的】分析小麦 LEA 基因TaLEA4 和 TaLEA5 及其编码蛋白的特征，比较它们在干旱、高盐、热和冷 胁迫过程中的表达模式，探讨这两个 LEA 基因在小麦抗逆调控过程中的生物学功能，为其在小麦抗逆分子育种中 的应用提供理论依据。【方法】利用RT-PCR 技术克隆小麦的LEA基因，通过生物信息学方法分析克隆基因及其编 码蛋白的结构特性，采用 qRT-PCR 技术检测克隆基因对 ABA 及非生物胁迫的响应模式。【结果】克隆了 2 个包含 完整编码框的小麦LEA基因 TaLEA4 和 TaLEA5，分别编码180和163个氨基酸，推断其分子量分别为18.8 和16.9 kD，理论等电点分别为 5.6 和 7.2。基因组序列分析发现，2 个 LEA 基因中均包含 1 个 100 bp 的内含子。氨基酸 序列分析发现，这两个LEA 基因编码蛋白均富含极性氨基酸（约占整个氨基酸序列的71%），具有较强的亲水性。 结构域分析显示，TaLEA4和 TaLEA5蛋白中均包含1个典型的LEA_4（pfam:02987）保守域，属于LEA_4类蛋白。 蛋白质高级结构分析显示，α-螺旋分别占 TaLEA4 和 TaLEA5 蛋白的 96.7%和 96.3%，并可形成弓形的空间结构； 在TaLEA4中，检测到1个配体PEV（C H NO P）的结合位点，而在TaLEA5 中存在2个这样的配体结合位点。表达 39 78 8 特性分析显示，2个LEA基因均可被植物激素ABA诱导而上调表达，其中，TaLEA4 的表达水平显著高于 TaLEA5； TaLEA4 在干旱、高盐和高温胁迫过程中均受胁迫诱导而迅速上调表达，但 TaLEA5 却只受干旱胁迫的诱导，且其 表达水平显著低于 TaLEA4；2个LEA基因对冷胁迫均无响应；干旱和高盐胁迫过程中，TaLEA4 在根系中的诱导表 达水平显著高于叶片，而热胁迫过程中该基因在叶片中的表达水平要显著高于根系，这可能与根系直接感受渗透 胁迫而叶片直接感受热胁迫有关。【结论】小麦TaLEA4 和 TaLEA5 均属于 LEA 基因家族的 LEA_4 亚类，具有较强 的亲水性，它们属于依赖于ABA胁迫响应基因调控网络；TaLEA4 可能在干旱、高盐和热胁迫过程中均发挥重要功 能，TaLEA5 仅参与小麦对干旱胁迫的响应，其作用要弱于 TaLEA4。 关键词：普通小麦；LEA基因；非生物胁迫；表达模式 Characterization of Two LEA Genes and Their Response to Abiotic Stresses in Wheat 1 2 1 1 1 LIU Lu-lu , CHEN Lei , ZHANG Chun-yan , SHI Rui-jie , REN Jiang-pi