hnrnp ab1在nsclc中的表达及其在nsclc发病机制中的作用研究.pdfVIP

目 录 中文 摘 要 一 1 英 文 摘 要 一 4 前 言一 6 第 一 部 分 Hn RN P A Z/Bl 蛋 白及 mR NA 在 非 小细 胞 肺 癌 中 的表 达 状 况 材 料 和 方 法 一 10 结 果一 17 讨 论 一-一一一一--一--一一 22 参 考 文 献 一 25 第 二 部 分 初 步探 讨 hnRNP A Z/BI 在 非 小细 胞肺 癌 发病 机制 中的作 用 材 料 和 方 法 一 27 结 果一 32 讨 论一 38 参 考 文 献 一 40 第 三 部 分 细 胞 块技 术 结合 免疫 组织 化 学研 究 hnRNP AZ/ BI 在 胸 水及痰 细 胞 学检 测 中 的意 义 材 料 和 方 法 一 42 结 果一 43 讨 论 一 49 参 考 文 献 一 52 结论 一 54 创 新 点一 55 综 述 --一--一-一一--一一一一 一 56 己发 表 论 文 一 68 致 谢 一 69 HnRNP AZ/B l 在 N SCLC 中的表 达及 其在 N SCLC 发 病 机 制 中的作用 研 究 中文 摘要 背 景 和 目的 肺 癌 的发病 率 和死 亡 率 目前 已经 排 在 各 种 恶 性 肿 瘤 的第 一位 ，但 其 发病 机 制 尚未 阐 明，且 缺 乏早 期 诊 断指 标 。核 不 均 一 核 糖 核 蛋 白 AZ/Bl (heterogeneou s nu C lear r ib 。nuC leoprote in AZ/B l，hnRNP AZ/B l) 是 一种 重 要 的 RNA 结合 蛋 白， 主 要 负责基 因转 录后 调控 。 目前 已知 DN A 修 复 酶 06一甲基 鸟嘿 吟一DNA 甲基转移 酶 (06一methy lguan ine DNA一m ethy ltran sfera se，MGMT )、8一轻基 鸟 嘿 吟 DNA 糖 营 酶 (8一oxoguan ine DNA g lycosy la se，OGG I)、氧 化 /还 原 因子一1 (r edox faetor l， ref一l) 、2 种 DNA 依赖 性 蛋 白激 酶 (DNA一dependent pro tein k ina se，DNA一PK ) — DNA一PKcs 和 ku 在肺 癌 组织 中 的表 达 与正 常肺 组织有 明显 差 别 ，均 与肺 癌 的 发 生相 关 。基 于 以上 背 景 ，本研 究 目的 旨在 观 察 hnRNP AZ/B1 蛋 白及 mR NA 在 非 小 细 胞 肺 癌 (non一Sm a ll Ce ll lung CanCer ，NSCLC)癌 组 织 及对 应 正 常肺 组 织 中 的 表达情 况 ; 检测 hnRNP AZ/B 一蛋 白与 oNA 修 复酶 MGMT 、OGG I、r ef一1、DNA 一pK es 和 Ku 的 m RNA 是 否 结合 ，初 步探 讨 其 对 5 种 DNA 修 复 酶 是 否 存在 转 录 后 调控 作 用 ， 试 图揭 示其在 NSCLC 发病机 制 中的作用 ; 并探 讨 痰 中检 测 hnRNP AZ/BI 在肺 癌 早 期 诊 断 中 的意义 以及 胸 水检 测 hnRNP AZ/ BI 对 于 鉴 别肺 腺 癌细 胞 与 间皮 细胞 的价 值 。 方 法 分 别 从 蛋 白水平及 mR NA 水平 检测 hnRNP AZ/Bl 在 NSCLC 中 的表 达 情 况 : 采 用 免疫 组 织化 学方法检 测 50 例 、W estern B lot 方法 检 测 10 例 及 荧 光 实 时定量 PCR (rea l一time PCR )方法 检 测 22 例 NSCLC 患者癌 组 织及 对 应 正常肺 组 织 中 hnRNP AZ/B I 的表 达情 况 ; 采 用 免疫共 沉 淀 (Co一imm unopr ee ip itat ion ，eo一Ip) 结合 逆 转 录 聚 合 酶链 反应 (RT一PCR) 的方 法 研 究人 肺 鳞 癌 细 胞 株 (HTB一182 )