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以重组np为抗gpmv抗体间接elisa检测方法的建立
摘要
摘要
1997年以来，在我国许多地区爆发了由鹅副粘病毒(Goose
的鹅的烈性传染病。该病是以消化道和呼吸道病变为主要特征，具有高度发病率和死亡率，
给养鹅业带来了很大的损失．国内外学者先后建立了琼脂扩散试验、中和试验、血凝抑制试
验等血清学诊断方法，在一定程度上为防治鹅副粘病毒病发挥了重要作用，但同时也存在灵
敏度差、操作烦琐、检测所需时间长等不足，己不适应更有效地控制该病的需要。
内，重组NP蛋白在大肠杆菌中获得了表达，并且进行了切胶纯化。用表达的融合蛋白作为
包被抗原，以灭活油苗免疫制得的鹅血清做为一抗。HRP标记的兔抗鹅血清作为二抗，并确
化，为开发标准化诊断试剂盒奠定了坚实的基础。通过对检测抗原的交叉试验及阻断试验均
证明，检测抗原只与抗GPMV抗体发生特异性结合。健康非免疫鹅血清及SPF鸡血清的检
测均出现阴性结果。鸡胚尿囊液中的GPMV可阻断检测抗原与相应阳性血清的结合，证明该
检测抗原的特异性是可靠的。所建立的方法重复性好．特异性强，灵敏度高。可用于GPMV
流行病学的调查和GPMV灭活苗免疫后血清抗体水平的检测。
关键词：鹅副粘病毒；重组NP蛋白；ELISA
ofIndirectELISAon
Development Based
RecombinantNP
for GPMV
DetectingAntibody
Abstract
Anewviraldiseasewhose was hasoutbrokanin areas
pathogengooseparamyxovirus many
in
ofchinasince1997．Characterisitieofthediseaseisthelesion the
mainly
in routine
tractand seriousloss
highmortality,causes breedingindustry．Thediagnostic
goose
methodsforGPMVweretheAgargelpreeipitin
havebeenestablished．Thesemethodshave roleincontrol which
playedimportant ofGPMV,but
has take time．Thesehavenotbeensuitablefortheneedsof
lower and methods
sensitivitylonger
efficientcontrolofGPMV．
The isthattherecembinant wastransformedinto
pGEX-6P-NP
study expressionplasmid
NP
recombinantwas inE．celland indirect
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