自组装寡肽分子T2对羟基磷灰石矿化影响(I)——自组装寡肽分子T2促进羟基磷灰石体外形成.pdfVIP

自组装寡肽分子T2 对羟基磷灰石矿化的影响（I ） —— 自组装寡肽分子T2 促进羟基磷灰石体外形成1 1 1 1 2 王磊 ，白薇 ， 冯海兰 ，贾欣茹 1 北京大学口腔医学院口腔医院修复科，北京 (100081) 2 北京大学化学和分子工程学院，北京 (100871) E-mail：fenghl@ 摘 要：目的：确定两亲性肽（Peptide Amphiphile ）分子T2 是否可以促进羟基磷灰石在凝 胶系统中矿化。方法：设计、合成两亲性肽分子 T2 ，得到其水溶液，利用双扩散凝胶系统 进行体外矿化研究，观察T2 分子对羟基磷灰石矿化速度的影响。结果：T2 可明显缩短羟基 磷灰石沉淀体外形成的时间。经 X 线衍射（XRD ）和扫描电镜（SEM ）检测，证实羟基磷 灰石沉淀具有非晶质特点。结论：自组装肽分子T2 可以促进羟基磷灰石矿化。其作用可能 与T2 分子中引入的负电荷区域有关。 关键词：自组装，寡肽，生物矿化，双扩散凝胶系统 中图分类号：Q81.42 1. 引言 复合硬组织替代材料可模拟生物组织结构，具有仿生性强，可控性强等优点，成为近年 来设计开发硬组织替代材料的重要方向。复合硬组织替代材料的研发，往往以分子自组装及 生物矿化为主要手段[1] 。其中较重要的方法是，1、寻找特定条件控制分子自组装，模拟天 然硬组织的多级结构；2 、对“基质介导（Matrix-Mediated ）方式”生物矿化进行模拟，对材 料中矿物相的种类、形态、排列进行模拟控制。 可自组装的分子利用静电引力等非共价键分子间作用，获得自组装性能[2] 。Zhang[3]和 Stupp[4]分别设计合成了两种可自组装为多级结构的两亲性肽。Stupp 进一步研究发现，在自 组装聚合物表面生长的羟基磷灰石晶体具有定向排列的特点。材料表面的高度磷酸化，可促 使羟基磷灰石晶体沉淀。Stupp 即以此为依据设计并得到可调控矿化的自组装寡肽。以往研 [5] 究也表明，负电荷聚集的表面与磷酸化表面类似，也具有促进羟基磷灰石晶体形成的能力 。 因此，本研究设计了一种两亲性寡肽分子——T2 ，并在其分子结构中引入负电荷基团，通 过固相法合成得到产物。并利用双扩散凝胶系统进行体外生物矿化试验，了解其对生物矿化 中羟基磷灰石晶体成核、晶化的影响。 2. 材料与方法 2.1 自组装寡肽T2 分子的合成 氨基酸原料，固相多肽合成仪、分离层析柱、高效液相色谱仪、质谱仪。 2.2 体外生物矿化 双扩散凝胶系统，粉末X 线衍射仪（XRD ）、扫描电镜（SEM ）、等离子发射光谱仪（ICP ）。 1本课题得到国家自然科学基金资助项目（National Natural Science Foundation of China ）编 和教育部博士点基金项目（Grant from the Ph.D. Programs Foundation of Ministry of Education of China ）编号20020001095 的资助。 -1- 2.3 试验方法 2.3.1 自组装寡肽T2 的合成 按T2 分子氨基酸序列，用多肽固相合成仪将氨基酸逐个连接成肽链，产物脱保护后纯 化、冻干，得到高纯度的寡肽分子T2 。质谱仪测定分子量，高效液相色谱纯度分析。 2.3.2 自组装寡肽T2 体外矿化试验 参见矿化系统模式图，见图1。 体方法如下： 图1 双扩散凝胶体系矿化系统模式图 Figure 1 Schematic diagram of the double-dif