抗生素暴露对小麦生长及根际微生物群落结构的影响.pdf

摘 要 本研究以小麦作为研究对象，选择应用最广泛的兽药抗生素一四环素和土霉素，研 究了兽药抗生素暴露情况下小麦根际微生物群落结构的变化和小麦苗期生长所受到的 影响，并对抗生素污染状况下小麦抗性内生细菌的种类及种属分布进行了初步探索，为 抗生素的合理使用提供了科学依据。 研究所取得的主要结论有以下三方面： (一)表征无抗生素暴露条件下小麦根际微生物群落的结构特征及优势细菌鉴定： 小麦根际土壤中微生物总数达至lJ5x108cfu g-1，约为非根际土壤的二倍。细菌比例最高， 放线菌次之，真菌最低；从中分离出10株数量优势细菌，经16SrRNA鉴定后与芽孢杆菌 属(Bacillus)有最大相似性；优势菌的生长在低浓度四环素和土霉素存在时就出现抑制， 对土霉素的敏感性高于四环素。 (二)小麦抗性内生细菌的数量及在植株中的分布研究： x104．1．95x106cfu 1)小麦内生菌数目在l g-1之间，抗性内生菌数目介于6．9x103和 rRNA 生物聚在一起，其中Bacillus类细菌最多，占59．1％。 2)对这22株抗性内生菌进行土霉素敏感性试验，其最低抑菌浓度(MIC)值介于 16．256ugml‘1之间；在小麦不同部位分离的抗性内生菌中，芽孢杆菌属内生菌明显占优 势，其中地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenifo瑚西)在小麦根际土壤、根、茎等器官中均分 离得到，另外在植株的同一器官均分离到不同种属的抗土霉素抗性内生菌。在小麦种子 中没有分离到任何土霉素抗性的内生菌。 (三)水培试验系统下四环素类抗生素污染对小麦苗期生长发育的影响： l。1)，小麦种子发芽率、 1)在有效抗生素剂量暴露下(0、O．8、4、20、60、100rag 根伸长和芽伸长对四环素和土霉素的生态毒性敏感顺序依次为：根伸长发芽率芽伸 长，土霉素处理产生的生态毒性明显高于四环素；小麦的根伸长抑制率(或芽伸长抑制 率)与抗生素浓度间均存在明显的剂量效应，20 ld以上浓度抑制作用尤为显著；水培 mg 液中微生物群落在两种抗生素的选择压力下，优势类群由细菌向真菌方向转变。 2)水培液细菌类群的PCR．DGGE图谱可分为两种模式：O．8和4l‘1水培液中微 mg 生物群落图谱与对照组相似，而高浓度(20l～、60 I～、1001-1)处理下DGGE mg mg mg 图谱结果比较一致。通过对高强度条带的切胶、测序、比对，发现它们与Acinetobacter， Sphingobacterium 关键词：四环素，土霉素，根际微生物，水培，PCR-DGGE，抗性内生菌，最低抑菌浓度 Il ABSTRACT Underthe of pressureveterinaryantibiotics，includingteWacycline(OTC)and The inwheat andwheat statuswere microbial communitydynamicchange rhiosphere growth investigated， researchalsofocusedonthe varietiesanddistributionin the Primary entophyte wheat，whichguidedproper