缺氧复氧对大鼠smc myocardin基因表达的影响.pdf

摘． 要 摘 要 目的：研究短期缺氧／复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响。 方法：无菌条件下取出大鼠胸主动脉，留取中膜，运用组织贴块法培养，采用 第4-7代细胞进行实验，实验前用含l％血清的DMEM培养基静止细胞24小时。 自制缺氧装置，检测其缺氧效果，建立体外细胞缺氧方案，通过观察细胞形态 学变化、死亡细胞记数等，判断缺氧刺激对体外培养平滑肌细胞活性的影响。 mRNA的表达变化。 及复氧后不同时间段myocardin 结果：1、运用组织贴块法成功培养原代细胞，培养细胞呈典型的‘峰谷’样生 长，可满足实验的需要。 2、自制缺氧装置24小时内氧分压明显降低且PH值波动不明显。对体外 细胞实施缺氧氧方案后，24小时内未见明显细胞肿大、漂浮和坏死现象。 mRNA 3、RT-PCR结果表明与正常对照组相比，平滑肌细胞myocardin 表达在缺氧后逐渐降低(PO．05)。缺氧8h降低最明显。且随着缺氧时间的延长， myocardin基因的表达水平逐渐回升，并增高；缺氧24小时复氧后，其表达水 平逐渐回落，复氧8小时时接近正常表达水平。 结论：缺氧／复氧影响大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因的表达。 关键词：Myocardin缺氧平滑肌细胞 Abstract Abstract the influenceof onthe hypoxiamyocardin Objective：toinvestigate geneexpression musclecells ofculturedrats’vascularsmooth Methods：thethoracicaortawasobtainedfrom ratsundercarefulsterile Sprague-Dawley smooth isolatedfromthemediaofthevesselandUSe conditions．Themuscle CelI(SMC)were attachment-blockculture．Useaself-made it effecandfounda hypoxiaequipment，detecthypoxia in When wereculturedunder of vitro．Toobservethe cells #anhypoxia cytoactive hypoxia was wasusedto the conditions，the observed，cell generalmorphologychange counting investigate RNAwas fromtissuewithTRIZOL RTPCR cytoactive．Toml reagent．Semi-quantified