基于SRAP标记的湘产百合核心种质库构建.pdfVIP

— ５６— 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第１期 童巧珍，高　昱，刘平安，等．基于ＳＲＡＰ标记的湘产百合核心种质库构建［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（１）：５６－６０． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０１．０１４ 基于ＳＲＡＰ标记的湘产百合核心种质库构建 童巧珍，高　昱，刘平安，蔡嘉洛，张亚利，樊　悦，易刚强 （湖南中医药大学，湖南长沙４１０２０８） 　　摘要：利用相关序列扩增多态性（ＳＲＡＰ）标记技术，以４５份初级种质代表的８７份湘产百合种质为材料，通过Ｐｏｐ Ｇｅｎｅ３２、ＮＴＳＹＳ－ＰＣ（Ｖｅｒｓｉｏｎ２．１）等软件筛选湘产百合核心种质。结果表明：共获得多态位点２１８个，物种水平上多 态性比例７８．４２％；通过对ＳＲＡＰ信息进行遗传多样性分析，使用逐步聚类取样法和分层抽样法筛选出１５份核心种 质，占收集资源总数的１７．２％；ｔ检验表明，核心种质的有效等位基因数、Ｎｅｉｓ遗传多样性指数、Ｓｈａｎｎｏｎｓ信息指数在 ０．０５水平上与初始种质差异不显著，说明核心种质能很好地代替初始种质。 　　关键词：湖南省；百合；核心种质；遗传多样性；ＳＲＡＰ；种质资源 ＋ 　　中图分类号：Ｓ６８２．２９０．２４　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０１－０５６－０４ 　　湖南省为我国百合主要产区之一，百合在湖南省各地均 数据。４５份初级种质来源及分组信息见表１。 有分布，以湘西自治州龙山县的龙山百合、邵阳市隆回县的龙 １．２　方法 ［１］ ［１０－１１］ 牙百合种植区域最广 。百合集药用、食用、观赏用途为一 １．２．１　分子标记方法　根据改良ＣＴＡＢ法 提取湘产百 ［１２］ 体，具有很高的经济价值。面对日益增长的百合需求，保护和 合种质ＤＮＡ，参照Ｌｉ等的原则 ，并作适当改进获得反应体 ２＋ 利用百合种质资源极为重要。近年来，种质资源研究在国内 系。ＳＲＡＰ－ＰＣＲ扩增反应体系为 ２０ Ｌ，其中 Ｍｇ 浓度 μ 外兴起，核心种质作为种质资源群体研究和利用的切入点，开 ２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰｓ浓度０．２ ｍｏｌ／Ｌ，引物浓度０．２ ｍｏｌ／Ｌ， μ μ 展相关研究可以避免遗传上的重复，从而保存丰富的遗传变 Ｔａｑ酶１Ｕ，模板ＤＮＡ５０ｎｇ。扩增程序：９４℃预变性５ｍｉｎ； ［２］ 异，是提高种质资源利用率的有效途径 ，但是核心种质研 ９４℃变性１ｍｉｎ，３７℃复性１ｍｉｎ，７２℃延伸２ｍｉｎ，５个循环； ［３］ ［４］ ［５］ 究大多集中在牡丹 、烟草 、水稻 等作物上，湘产百合核 ９４℃变性１ｍｉｎ，５０℃复性 １ｍｉｎ，７２℃延伸２ｍｉｎ，３５个循 心种质研究尚未见报道。依靠基因型信息处理获得的核心种 环；７２℃延伸１０ｍｉｎ，４℃保存；扩增产物经 １．５％琼脂糖凝 质，主