β-榄香烯对肺癌细胞株a549体外放射增敏作用实验研究.pdfVIP

t3．榄香烯对肺腺癌细胞株A549体外放射 增敏作用实验研究 硕士生姓名： 田莹莹 指导教师： 邹丽娟 教授 指导小组： 张 卓副教授 专业名称： 肿瘤学 摘 要 放射治疗是根治恶性肿瘤的主要手段之一，临床约有70％的恶性肿 瘤需要放射治疗，由于肿瘤细胞的生物学特性及局部微环境等因素的影 响往往致放射治疗疗效不尽如人意，因此，寻找有效的放射增敏剂具有重 要意义。 性地增敏乏氧细胞，具有较好的增敏性，因其临床严重的毒副反应，大大限 制了临床上的运用。由于中草药毒副作用小，中药放疗增敏剂日益受到 重视。近年来，人们发现某些中药具有放射增敏效应…。榄香烯是从姜科 植物温郁金中提取的非细胞毒性抗肿瘤药，具有广谱抗肿瘤作用，毒副 作用小，能提高肿瘤放射增敏效应。过去对榄香烯抗癌作用机制的研究 仅限于榄香烯对肿瘤细胞增殖、分化和凋亡、免疫原性等的影响，关于 其作用靶点研究很少报道。 ‘ 本研究选用低细胞毒性的p．榄香烯作用于肺腺癌A549细胞，观察 13．榄香烯对A549细胞体外放射增敏作用，初步探讨放射增敏作用靶点， 为B．榄香烯放射增敏剂临床应用提供理论依据。 目的：研究B．榄香烯对人肺腺癌A549细胞株放射敏感性的影响， 探讨其放射敏感性与Ku70、Ku80mRNA表达的关系。 方法：本实验采用人肺腺癌细胞株A549作为研究对象，13．榄香烯 由大连金港制药有限公司提供，细胞在RPMI．1640培养液中培养，实验 组用含不同浓度(1 0ug／ml、20ug／ml、40ug／ml、80ug／ml、160ug／ml、320ug／m1) B．榄香烯RPMI．1 640培养液进行培养，在不同照射剂量(2Gy、4Gy、 6Gy、8Gy、l 0Gy)下直线加速器6MV．X线照射，采用MTT法测定不同 浓度13．榄香烯对A549细胞的生长抑制率；克隆形成率观察B．榄香烯对 mRNA的表达。 20ug／m1)联合放疗后KU70及KU80 结果： 2．B．榄香烯对A549细胞有显著抑制作用，随着药物浓度的增大， OD值逐渐减小，细胞的抑制率逐渐增高(p0．05)。 B．榄香烯作用24h后联合不同剂量照射的A549细胞测 3．20ug／ml 0Gy)组其OD值 OD值。单纯放疗(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、1 0．544士0．031、0．376士O．01 B．榄香烯作用24小时后联合上 5，20ug／ml 6、0．474士0．011、0．345士0．01 0．562士0．01 5、0．205士0．014。结果提 B．榄香烯联合放疗组OD值均较单纯放疗组降 示：相同剂量下，20ug／ml 低。统计学分析组间有显著性差异(PO．05)。初步判断0．榄香烯对A549 细胞有放射增敏作用。 B．榄香烯作用24小时后联合不同剂量的细胞 4．10ug／ml和20ug／ml 克隆数及存活率的检测，单纯放疗(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy) 2、82士2：35、64士3．17、45士‘2．06、24士 组克隆数分别为97士3．1 3．18、12士1．64，1 B．榄香烯作用24小时后联合上述照射剂量放 0ug／ml 疗组细胞克隆数分别为92士3．23、73士2．51、55士3．84、36士4．08、 l B．榄香烯作用24小时后联合上述