中药乙醇提取液预幽门螺杆菌分泌空泡毒素的研究.pdf

摘要 摘要 幽门螺杆菌(H．pylori)是一类定植于人胃粘膜的革兰阴性，微需氧螺杆菌， 其持续定植于胃粘膜可导致慢性萎缩性胃炎，也是消化性溃疡，胃腺癌，胃粘 膜淋巴组织相关性淋巴瘤的主要致病因素。H．pylofi的致病性与其分泌的多种毒 白毒素，可作为单一毒力因子引起细胞空泡化，细胞凋亡，细胞骨架重排降解 甚至细胞死亡，是H．pylofi重要的毒力因子。我国拥有丰富的中医药资源，中 药具有毒副作用小，耐药性低，治疗费用少的优势。因此，中药治疗已成为未 来研制治疗H．pylofi药物的手段之一，但其具体作用机制以及对H．pylori致病 性影响方面的研究几乎还处于空白。基于上述理由，课题组提出如下工作假说， 黄莲、黄芩等中药提取液除了抑制细菌的生物合成，抑制细菌的繁殖作用之外， 变为非致病性。这为研究抗幽门螺杆菌感染的中药的独特的药理作用开辟了一 条新途径。目的： 观察中药在体外能否有效地抑制H．pylori空泡毒素的分泌， 从而探索其作用机制。方法：1．用光镜及四甲基偶氮唑盐(Mm法测定中药提 取液对实验用HeLa细胞的无毒浓度．2．用平皿稀释法测定中药最低抑菌浓度，取 略低于最低抑菌浓度为最后的实验浓度。3．中药乙醇提取液对于H．pylori空泡毒 素分泌影响的研究：用中性红摄入法和光镜直接计数法观察产生空泡细胞产生 率．4．统计方法：使用SPSSI1．5专业统计软件进行数据分析。实验数据以平均 数±标准差(±s)表示，各试验组与对照组间差异性采用t检验，P0．05认为有显 著差异。结果：1．体外筛选出的有效药物：黄连、黄芩、厚朴、槟榔、山楂、 白芍、元胡作用后的H．pylofi液体培养上清中的空泡毒素量都明显的下降，致 HeLa细胞的空泡化程度明显降低。结论：1．黄连、黄芩、厚朴、槟榔、山楂、 白芍、元胡在体外能有效抑制H．pylod空泡毒素的分泌。 关键词：幽门螺杆菌：中药乙醇提取液：空泡毒素VacA；中性红摄入实验 n Abstract ABSTRACT a and bacterial Helicobacteris gram—negative，spiral-shaped pylori microaerophilic which atthehumanstomach．Helicobacterisassociated pathogencolony pylori withchronic andincreasedriskofgastroduodenalulceration，gastric gastritis adenocarcinomaand factors mucosa-asssociated—lymphoid-tissuelymphoms．Several havebeenshowntobeessentialtobacterialcolonizationofthestomachmucosa． an factorin VacAisconsideredtobe virulence the important pathogenesispeptic actsinsidecellsandinducesthe ulcerdisease．VacAsecretedHelicobacter by pylori formationofvacuolesand withvarious ofthecell