大鼠大脑中动脉血再灌注损伤后膜铁转运辅助蛋白的表达变化研究及作用探讨.pdf

大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤后膜铁转运辅助蛋白的 表达变化研究及作用探讨 研究生： 孔顺利 专 业： 神经病学 导 师： 薛慎伍 教授 中文摘要 第一部分：大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型的建立 脑血管疾病已成为目前人类的第三大重要的死亡原因之一…，特别是发 病率、致残率高，治愈率低，尤其是大面积、基底节区脑梗死对人类危害更 大，因此对该类疾病的防治显得非常重要，可为临床实行超早期治疗与康复 护理训练打下基础。因此就需要能制作出可靠的、能重复使用的、能模拟临 床病理生理变化的动物模型。近年来人们越来越多的使用线栓法制作大鼠局 造性缺血性模型，在于它能近于模拟人类大脑中动脉脑缺血病理过程【21，从 而达到科研的目的。人类最为常见的缺血类型就是大脑中动脉梗塞，所以在 实验中动物大脑中动脉栓塞模型应用的也就最多，参照Zealonga线栓法，并 加以改进，在实验中使用聚乙烯醇处理后的兔须作为线栓制作MCAO模型， 好处在于处理后线栓遇血发生膨胀，可使线栓能够充满所需要栓塞的血管， 使血流完全中断，进而提高了模型制作的成功率；使用颈总动脉(CCA)及 颈外动脉(ECA)两种不同的进线方法，通过比较神经肌肉运动功能评分、 前庭功能评分、脑梗死体积等，进而得出两种制作方法的优缺点。 目的 用两种进线法建立Wistar大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型，比较这两 种方法的优劣，以观察模型的可靠性，为早期诊治缺血性脑血管病提供理论 依据。 方法 线组(30只)，后两组按照处死时间分6个亚组，即缺血再灌注后4小时、8 小时、l6小时、32小时、64小时、128小时，6个亚组，每亚组5只大鼠， 建立大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型。参照Zealonga的线栓法，加以改进， 使用兔须替代尼龙线，经聚乙烯醇处理后分别由颈总动脉(CCA)和颈外动 脉(ECA)进线制作栓塞模型。缺血90分钟后，向外抽拔线栓实现再灌注， 然后在再灌注后4小时、8小时、16小时、32小时、64小时、128小时联合 应用神经肌肉运动功能评分法、前庭运动功能评分法评价大鼠运动功能，3 天后处死大鼠，测定大鼠大脑梗塞体积并进行比较两种方法的优缺点。 结果 颈总动脉进线法和颈外动脉进线法神经肌肉功能评分、前庭功能评分、 ％和30．5％士3．5％，两法比较神经肌肉功能评分及前庭功能评分差异有统计 学意义(p0．05)；两法脑梗死体积相比差异亦有统计学意义(p0．05)。 结论 两种方法制作的大鼠脑缺血模型的均出现神经功能障碍，脑组织缺血梗 死表现。与颈总动脉进线法相比，颈外动脉进线法大鼠神经行为学评分高、 脑梗死体积大、成功率高，模型稳定性好。 关健词 局灶性脑缺血，动物模型，Wistar大鼠 第二部分：脑缺血再灌注损伤后膜铁转运辅助蛋白的表达与 变化研究及作用探讨 铁是生命体内不可缺少的微量元素，同样又是人体中最丰富的过渡金属 【31。最近研究发现铁的功能远比人们想象的重要。铁在人脑中分布广泛，但 这种分布并不是均匀的。人类神经系统的各种细胞中几乎都有铁的分布，如 神经元、少突触胶质细胞、小胶质细胞和一部分星形胶质细胞都含量较多， 其中含铁量最多的是少突胶质细胞。脑内铁具有极其重要的作用，维持铁的 稳念对机体非常重要，众多的研究表明急性脑缺血后机体各器官会出现铁代 谢紊乱，铁负荷过重可介导一系列的病理生理变化，从而诱发各种疾病。 receptor， T：fR)是参与铁在脑组织中吸收的两种途径的主要蛋白。研究发现铁在脑细胞 中的代谢机制与外周代谢机制大不相同，且前者代谢及平衡机制更为复杂， 已有研究证明，铁代谢的主要途径是转铁蛋白受体介导的细胞转铁蛋白 1(FerroportinlFPl)、二价金属转运体(DMT1)等也参与了脑的铁代谢过程。 anemic，sla) 小鼠时发现的一种新的铁转运相关蛋白。该蛋白的表达有明显的组织特异 性，其中小肠高度表达。研究表明141在小鼠和大鼠的大脑皮层、纹状体、