低分子肝素对大肺纤维化干预机制研究.pdf

中文摘要 低分子肝素对大鼠肺纤维化干预机制研究 摘 要 目的： 观察低分子肝素对博莱霉素诱发的大鼠肺纤维化模型 的治疗作用，通过比较正常对照组、模型组、激素组和低分 子肝素组大鼠肺组织中的羟脯氨酸(HYP)和酸性成纤维细胞 growth 纤维化的可能作用机制，为临床低分子肝素治疗肺纤维化患 者提供理论支持i 方法： 选取120只雄性SD大鼠，适应性饲养一周后，随机分 成正常对照组(A组)、模型组(B组)、激素组(c组)、低 分子肝素组(D组)。B组、C组、D组经气管内一次性注入 博莱霉素氏(5m∥kg)制作大鼠肺纤维化模型，A组气管内一 次性注入等量生理盐水；C组肌肉注射地塞米松0．5mg／kg／d， 皮下注射。各组大鼠分别于造模后1天、3天、7天、14天、 28天留取肺组织、血清、肺泡灌洗液。取肺组织做HE、Masson 染色和免疫组化方法测定肺组织中的TGF．B1、aFGF的阳性 面积比，并取肺组织测定肺组织胶原含量，取血清和肺泡灌 洗液测定TGF-B。含量。观察低分子肝素治疗肺纤维化的效 果。 结果： 中文摘要 1HE染色所见：正常对照组各时相点均未出现明显的病理 变化。模型组第1天肺泡腔内出现以巨噬细胞、中性粒细胞 为主的急性炎症细胞浸润。第3天肺泡腔内巨噬细胞、中性 粒细胞、淋巴细胞渗出增多，肺泡间隔水肿增宽，肺泡炎加 重。第7天肺泡腔以慢性炎症细胞为主，形成严重肺泡炎， 成纤维细胞开始增生，毛细血管增生，病灶内肺泡萎陷。第 14天肺泡炎逐渐减轻，肺泡壁增厚，肺纤维组织合成增加。 第28天大鼠肺组织炎症减轻，成纤维细胞增多，胶原纤维 明显增多，形成灶状纤维化，部分肺泡间隔明显增宽。激素 治疗组和低分子肝素治疗组肺泡间隔增宽较模型组明显减 轻，单核细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润较轻，肺泡结构基本 正常，纤维化的病理改变也较模型组明显减轻。 2Masson染色：正常对照组可见淡蓝色的基质胶原较少。模 型组基质胶原随造模时间延长而明显增多；激素治疗组和低 分子肝素治疗组各时间相基质胶原含量随造模时间延长而 轻度升高，均较模型组有不同程度的减少。 3肺组织羟脯氨酸(HYP)含量变化：第1天和第3天模型组和 激素治疗组、低分子肝素治疗组肺组织HYP含量轻微高于 正常对照组，但无统计学意义(P0．05)，模型组HYP含量随 造模时间的延长逐渐增高，而激素治疗和低分子肝素治疗组 HYP含量呈低水平增高趋势。7天、14天、28天激素治疗 和低分子肝素治疗组与模型组比较有统计学意义(P0．01)。 各时相激素治疗组HYP含量与低分子肝素治疗组比较无统 计学意义(P-0．05)，正常对照组各时相点方差分析无统计学 意义(PO．05)。 4大鼠TGF-B 1含量变化：血清及肺泡灌洗液中：3天、7 中文摘要 天、14天、28天各时间点模型组血清TGF-B1含量均较正 常对照组、激素组及低分子肝素组明显增高(P0．01)，1天 点模型组TGF-B。含量稍高于其它各组，但无统计学意义 口0．05)；各时间点低分子肝素组血清TGF-131含量高于正 常对照组(P0．01)；激素组血清各时问点TGF．131含量与低 分子肝素治疗组比较无统计学意义(P0．05)；肺泡灌洗液与 血清各时间点TGF．B 1含量变化一致。大鼠肺组织TGF．131 蛋白表达：模型组大鼠TGF．13l表达量高于正常对照组、激 素组及低分子肝素组，第3．28天时间点与三组比较均有统计 学意义(PO．01)；低分子肝素组TGF．Bl表达量高于正常对 照组，但与正常对照组比较无统计学意义(PO。05)；正常对 照组的少数支气管粘膜上皮细胞的胞浆可发现少量TGF-p l 蛋白弱表达，也可偶见TGF-口1弱阳性的肺胞巨噬细胞。 5大鼠肺组织aFGF含量的变化：第1、3天时间点正常组和 低分子肝素组aFGF含量无统计学意义佃0．05)，模型组和激 素组aFGF无统计学意义(P0．05)；正常组、低分子肝素组和 模型组、激素组比较