单眼形觉剥夺大反缝治疗前后视中枢nnos的表达.pdf

中文摘要 单眼形觉剥夺大鼠反缝治疗前后视中枢 nNOS的表达 摘 要 目的：本课题运用N0sI型(神经型一氧化氮合酶， 体(dLGN)和视皮层17区反缝治疗前后的表达变化，探讨关 键期内剥夺性弱视治疗前后视中枢神经元功能状态的改 变。进一步论证N0在视觉发育可塑性及剥夺性弱视发病机 制中的作用，以助于在分子水平阐明弱视的发病机理，为 弱视的预防和治疗提供一条新的途径。 方法：l、动物模型的建立与分组：14日龄健康雄性 sD大鼠接受左眼眼睑缝合手术造成剥夺性弱视模型，术后 2周打开左眼并行对侧眼(右眼)眼睑缝合进行遮盖治疗。 动物分为三组：剥夺组(MonocIllar 只，于14日龄时缝合左眼眼睑，再分为I、112个小组，MD 日龄)处死；治疗组(Reverse 处死；正常对照组(N_omal 龄时处死。 2、标本获取与制备：4％多聚甲醛经快速左心室升主动 脉插管灌注固定后开颅取出脑组织，冰冻切片机上冠状切 片，贯穿整个dLGN与视皮层17区，厚度40um。视皮层 17区每个标本每隔3张切片取一张行NissI染色。 中文摘要 3、采用sABC免疫组织化学方法检测各组切片nN0s 阳性神经元在各组的表达。 4、将视皮层17区各组切片做Nissl染色(克紫染 色)，作为nN0s免疫组织化学染色结果分析的分层参 考。 5、切片观察：用显微图象分析系统比较各组间nN0s 阳性神经元在dLGN和视皮质17区分布差异。选择17区单 眼区域(v1区内侧2／3区0c1M区)进行细胞计数。用免 疫阳性细胞数／切片核团面积换算成细胞密度。用Td2000 真彩色细胞图象分析系统进行视皮质17区nNOS阳性神经 元胞体截面积和树突总长度测量。 6、数据处理：用SPsSl2．O统计软件包进行统计学处 理：用两独立样本t检验进行两个均数的比较，用单因素方 差分析进行多个均数的两两比较。 结果：1、正常组不同鼠龄dLGN的nN0s阳性细胞形 (II)两组阳性神经元在视皮质各层均有分布，但在II／III 各层nN0s阳性细胞密度(Ⅳ层除外)显著降低(II／III、 长度明显减少(P0．01)。 形态和分布与同龄正常大鼠Nc(I)组相似，但dLGN 中文摘要 (I)组也明显减少。 性神经元密度、胞体截面积和树突总长度比较均无统计学 意义。 结论：1、N0与视觉发育可塑性有密切关系，参与了 大鼠dLGN和视皮层17区的可塑性变化。 层17区nN0s的表达在反缝治疗前后无明显变化。从分子 水平验证了敏感期内遮盖治疗对剥夺性弱视视中枢神经元 功能状态的恢复作用，N0可能在dLGN水平参与了这一过 程。 3、nN0s在大鼠视觉中枢的表达具有时空特异性，在 dLGN表达高峰时间较视皮层长。在敏感期后期，N0可能 并不直接调节视皮层的发育，而是影响外膝体的发育分 化，进而通过其它机制影响视皮层的可塑性发育。 关键词：nNOS：单眼剥夺；反缝治疗；外侧膝状体 视皮层17区 英文摘要 ofnNOS inthe VisualCentral Changes Expression ofMonocularIhts befbreandafter System Deprived Reverse SutureThatment ABSTRACT ordertodiscussther01eof objectiVe：In