维甲酸诱导腭裂鼠出生后未分化腭间充质细胞定位研究.pdfVIP

维甲酸诱导腭裂小鼠出生后未分化腭间充质 细胞定位研究 硕士研究生：王晓英 指导教师：肖 晶 教授 专业名称：口腔基础医学 摘要 先天性唇腭裂是最常见的先天性发育畸形，常因为腭板短小而使手术治疗难 以完全修复缺损。唇腭部组织再生修复目前仅见于干细胞促进的骨组织再生，而 对腭部其他组织包括骨、骨骼肌和肌腱、软骨以及神经等未见报道。 term 目的：本研究利用外源性BrdU可以标记slow-cyclinglong label—retaining 色，定位正常小鼠出生后腭部未分化间充质细胞，进而检测维甲酸诱导腭裂小鼠 腭部未分化间充质细胞与正常表达部位和模式的差异。 方法：选择SPF级ICR孕鼠于E10给予维甲酸管饲做为实验组，建立小鼠腭 裂模型。利用具有分化潜能细胞的慢周期特性，在E12给孕鼠80mg／kg的BrdU腹 腔注射，分别在P0对照组和实验组获得新生小鼠组织进行灌流固定，常规脱水、 透明、浸蜡、包埋，连续41am蜡片备用。利用免疫荧光染色法，检测腭间充质细 胞BrdU以及Stro．1、P75及CD57表达水平和分布。 结果： 1．P75和CD57阳性表达在细胞膜上。在正常对照组中，强表达在未发生骨 化的腭中缝处的未分化间充质细胞，P75在邻近上皮的间充质中也有表达。在腭上 皮中CD57表达在棘细胞全层，而P75特异性地表达在邻近基底层的棘细胞中。 在维甲酸诱导腭裂组中，主要表达在血管周围及骨化中心周围的未分化间充质中， CD57在腭突远中端有较强阳性表达，在上皮中均未见表达。 2．BrdU阳性表达在细胞核中，主要分为致密型强表达和散在颗粒型弱表达两 种类型。在正常对照组中，致密型强表达集中在未发生骨化的腭中缝处的未分化 间充质细胞中，前后腭无明显差异(P0．05)。在维甲酸诱导腭裂组中，致密型 强表达分布于腭突正中嵴处以及血管周围的间充质细胞中，前部腭突多于后部。 致密型强表达在血管周围有部分重叠，但阳性表达细胞数量较少。 结论；正常小鼠在出生后腭部未分化间充质细胞数量较少，并主要局限于腭 中缝处；而在出生后维甲酸诱导腭裂小鼠中，数量较多且较广泛存在于血管周围 的腭突未分化间充质细胞为其组织工程学修复提供了可能。 关键词：腭间充质细胞；BrdU；Stro．1；P75；CD57 Locationofundifferentiated cellin mesenchymal palatal · l ·● ● ●l ● 1 l retlnOICaCl1-innucenm0USe Oostnatal Master degreecandidate：XiaoyingWang Xiao Supervisor：ProfessorJing Major：Stomatology Abstract cleft and arethemostcommon Background：Congenitallip palate congenital becauseofshort isdifficult malformations，oftenleaving surger