维甲酸诱导腭裂鼠出生前后wnt通路相关信号分子的表达.pdfVIP

维甲酸诱导腭裂小鼠出生前后Wnt通路相关 信号分子的表达 硕士生姓名： 吴 慧 指导教师： 肖晶教授 专业名称： 口腔基础医学 摘要 背景：维甲酸诱导腭裂小鼠是探讨基因与环境相互作用导致先天性腭裂发生 的常用且可靠动物模型之一。维甲酸功能是通过与其膜上受体结合，经细胞浆内 的维甲酸结合蛋白运输到核内与相应受体结合，最终通过基因转录调控来实现的， Wnt、S1111和BMP等信号分子通路中的重要基因都被证明参与到维甲酸致腭裂的发 病过程中，维甲酸导致腭裂的机制是直接影响神经嵴细胞(颌面部突起的起源) 的游走和增殖，主要通过干扰DNA合成而抑制腭突间充质细胞的增殖，与Wnt5a, Shh，BMP．4和FGF．10等大多数基因敲除小鼠的腭裂表现型和发生机制相似。 目的：验证本课题组前期完成的维甲酸诱导腭裂小鼠腭组织全基因组筛选中 发育和腭裂形成出生前后表达变化。探讨维甲酸诱导腭裂小鼠出生后对Wnt通路 的影响。 方法：按照100 mg／kg体重管饲ICR小鼠维甲酸建立小鼠腭裂模型。在无菌 环境下将E18(embryodayl8,E18)的胎鼠和出生后PNO(postnatalday 0，PN0)的幼 鼠，于体式显微镜底下取出腭组织。应用SYBR*GreenI实时定量PCR技术及免 疫组织化学方法检测GSK-31B，Fzd3及p-TrCP的表达水平与部位。 结果：l、出生前后GSK．3D，Fzd3及13-TrCP基因表达水平改变 在El 2、在出生后GSK-313、Fzd3和13-TrCP蛋白分布 在腭突上皮，口腔侧腭上皮表达水平较强，在腭问充质中GSK．3B和Fzd3无表达， B、Fzd3和13-TrCP蛋白强表达在腭突上皮上， 13-TrCP呈弱表达。实验组中GSK．3 较强。 结论：本研究结果表明在出生后维甲酸诱导腭裂小鼠腭上皮中GSK-313、Fzd3 和13-TrCP等Wnt通路抑制因子表达水平上调，提示了维甲酸可能通过调控上述基 因而对Wnt信号分子通路的活化具有抑制作用。 关键词：维甲酸 腭裂Wm信号通路动物模型 2 of MoleculeRelatedWnt Signaling Signal ExpressionChange inMouseCleftPalateInducedRetinoicAcid Pathway by Perinatal During Stage Wu Master candidate：Hui degree Xiao Supervisor：ProfessorJing Major：Stomatology Abstract acid。inducedcleft mnllceisacommonandreliable Background：Retinoicpalate animalmodelto themechanismof cleft whichisc