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透明质酸改性聚乳酸支架构建组织工程化软骨的实验研究 中文摘要 透明质酸改性聚乳酸支架构建组织工程化 软骨的实验研究 专 业：口腔临床医学 硕士生：刘春栋 指导老师：张志光教授 摘要 关节软骨是一种长期不断负重的高分化的组织，自身修复能力较差。关节盘 及颞下颌关节软骨在颞下颌关节行使功能中起着重要的作用，但目前对于退行 性病变，如晚期关节盘穿孔、破损尚无有效的手段来修复。骨关节病 大难题。近年来，随着细胞生物学与生物材料学的迅速发展而兴起的软骨组织工 程为软骨缺损的修复带来了新的希望。 尽管软骨组织工程技术发展迅速，研究领域不断扩大，但是仍然有许多问题 有待解决。软骨种子细胞研究是保证组织工程持续性深入研究的前提。自体软骨 细胞虽为软骨组织工程种子细胞的最佳来源，但由于取材有限，传代培养又易发生 “去分化”，所以目前条件下难以从小量自体软骨组织经体外培养扩增获取大量 有正常功能的软骨细胞。相比之下，同种异体软骨细胞来源广、易获取，是一种值 得研究的软骨种子细胞来源之一。众多学者分别在多种动物体内不但构建出自体 组织工程化软骨组织，而且成功地获得了同种异体组织工程化软骨，并证实同种 异体组织工程化软骨在宿主体内可长期存留而无明显的免疫排斥。 组织工程支架的选择是组织工程研究的焦点之一。目前用作软骨组织工程基 质的支架材料有聚乳酸[polylactic 及纤维蛋白的应用最广泛。PLA、PGA等高分子聚合材料生物相容性并非很理 透明质酸改性聚乳酸支架构建组织工程化软骨的实验研究 中文摘要 、 想，其亲水性差，对细胞吸附不足。聚乳酸材料不具备细胞外基质材料的良好细 胞亲和性能，而低细胞亲和性成为制约其成为理想组织工程支架材料的主要障碍 之一。大然的支架材料生物相容性较为优越，但存在力学性能较差、加工成型性 能差等缺陷。 acid，HA)是软骨基质的主要成分之一，在软骨生长 透明质酸(hyaluronic 和基质形成过程中起相当重要的作用，被认为是软骨基底物质的“脊柱”。透明 质酸及其衍生物也是软骨组织工程中的常用材料。 将PLA、PGA等高分子聚合材料利用天然的材料进行改性可得到生物相容 性及细胞亲和力较好的支架材料。有些学者利用胶原改性支架进行软骨组织工程 的研究衰明其可行性。许多研究者利用人工合成材料和天然可降解的聚合物的复 合材料作为软骨组织工程的支架材料。 本实验利用透明质酸改性聚乳酸来构建同种异体动物组织工程软骨，分析探 讨透明质酸在构建组织工程化软骨中的应用意义，同时探讨透明质酸改性聚乳酸 构建组织工程软骨的可行性。 目的 以HA对PLA多孔支架的进行改性，观察改性后支架的细胞相容性的改变， 并利用改性后支架复合同种异体软骨细胞在兔体内构建组织工程软骨，探讨HA 改性PLA支架构建组织工程化软骨的可行性。 第一部分透明质酸改性聚乳酸支架的实验研究 材料和方法 1．高孔隙率PLA支架的改性：采用盐析法制备出高孔隙率PLA支架，采用 低浓度NaOH进行表面轻度水解后，利用EDC和HA进行支架的改性。 2．取PLA及HA改性PLA支架2块行扫描电子显微镜观察。 3．新型PLA支架与改性PLA支架的亲水性观察。 1)亲水性：取新型PLA支架及改性PLA支架各6块，于湿盒中各在材料 上滴一滴水，观察水滴的渗入情况。 II 透明质酸改性聚乳酸支架构建组织L．程化软骨的实验研究 中文摘要 、 2)保水能力与吸水能力：本文采用两种不同方法对透明质酸改性PLA支 架材料的水亲和力情况进行了表征(多孔支架的保水能力和吸水能力)。 N保水力，吸求力=(W吸求后重量一W千重)，W干重×1