地西他滨联合细胞因子活化的DLI治疗急性白血病移植后复发小鼠模型的建立及作用机制的探究.pdfVIP

地西他滨联合细胞因子活化的DLI治疗急性白血病移植后复发小鼠模型的建立及其作用机制的探究 中文摘要 地西他滨联合细胞因子活化的DLI 治疗急性白血病移植 后复发小鼠模型的建立及其作用机制的探究 中文摘要 目的：建立以荷EL9611红白血病细胞的BALB/c（H-2d ）小鼠为受鼠，BALB/C×C57BL/6 杂交F1代CB6F1 （H-2d/b ）小鼠为供鼠的四大模型：MHC半相合异基因骨髓移植后复 发模型、常规供体淋巴细胞输注（tDLI ）模型、细胞因子干扰素-α （IFN-α ）活化的 供体淋巴细胞输注（aDLI ）模型，地西他滨联合aDLI （DAC+aDLI ）模型，比较不同 DLI组GVL效应和GVHD差异，并进行相关免疫作用机制的探究 方法： 建立荷 EL9611 （H-2d ）红白血病细胞的BALB/c H-2d 小鼠接受 BALB/C×C57BL/6 杂交F1 代小鼠CB6F1H-2d/b 来源的MHC 半相合异基因骨髓移植 （BMT ）模型。移植前制备供鼠骨髓细胞（BMCs ）和脾细胞（SCs），BALB/c小鼠 6 提前7天接种1×10 个EL9611 白血病细胞，在X射线直线加速器8Gy全身照射（TBI ） 后行（供鼠）CB6F1H-2d/b→（受鼠）BALB/c H-2d方向骨髓移植，实验分为两部分： 第一部分：异基因骨髓移植后复发模型及DLI组脾细胞输注数目探讨。分为：A组（异 6 基因骨髓移植后复发模型）：TBI后输注供鼠来源的BMCs5 ×10 个，不给予任何治疗； 6 7 B组（tDLI组）：TBI后输注供鼠来源的BMCs5 ×10 个+不同剂量SCs：1×10 (B1组) ， 7 7 1.5×10 (B2组) ，2 ×10 （B3组）；C组 （aDLI组）：TBI后输注供鼠来源的BMCs5 6 7 7 7 ×10 个+不同剂量SCs：1×10 (C1组) ，1.5×10 (C2组) ，2 ×10 （C3组），3天后开始 予重组IFN-α 20000U/d皮下注射，出现严重GVHD时停药。比较各组小鼠生存期及 GVHD表现，得出最佳脾细胞输注数目。第二部分：DLI治疗组。分为：D组（tDLI 6 7 组）：TBI后输注供鼠来源的BMCs5 ×10 个+SCs 1.5 ×10 ；E组（aDLI组）：TBI后 6 7 输注供鼠来源的BMCs5 ×10 个+SCs 1.5×10 ，3天后开始予重组IFN-α 20000U/d皮下 注射，出现严重GVHD时停药；F组（DAC+aDLI组）：TBI后输注供鼠来源的BMCs5 6 7 ×10 个，SC1.5 ×10 个，3天后开始予地西他滨（达珂）1mg/kg/只皮下注射×3天， 重组IFN-α 20000U/d皮下注射，GVHD反应严重时停药。每组小鼠10只，每组实验重 复三次。观察各组小鼠生存时间、白血病负荷、GVHD表现、组织病理学改变等；并 I 中文摘要 细胞因子活化的供体淋巴细胞输注治疗急性白血病移植后复发小鼠模型的建立及其作用机制的探究 + 通过流式细胞术比较D组、E组和F组小鼠移植后外周血活化的CD8 T淋巴细胞，外周 + + 血和肝脏、脾脏、肺CD4 CD25 Treg细胞的表达；通过酶联免疫吸附试