硅基荧光纳米粒标记食源性病原菌检测方法研究.pdf

摘要 硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究 学科、专、lk：医学、营养与食品卫生学 入学时间：2007．9 硕士研究生姓名：徐欢 答辩时问：2009．6 指导敦师：王周平(教授) 授予学位时间： 摘 要 目自仃，己报道的食源性致病菌检测方法多种多样，但各有其优缺点。本文将纳米探 针技术与荧光分析方法结合应『f】于免疫分析及DNA杂交分析，建立了新型分析方法体 系，实现了对目标物的超微量检测。 人IgG的检测。在最佳实验条件下，荧光强度和人lgG浓度在l～100ng／mL范围内成线 性，检出限0．3ng／mL。 氏菌序列特异寡核苷酸探针结合构建荧光纳米生物探针，以其为显示探针与沙门氏菌序 列特异寡核苷酸捕获探针一起通过DNA杂交捕获目标DNA，通过检测显示探针荧光强 度定量目标DNA含量。结果表明，荧光强度和目标DNA浓度在10～1000fmol／L范围 内呈线性关系，检出限3fmol／L。采用同样的原理构建了金黄色葡萄球菌目标DNA的 新型分析万弘，荧光强度与目标DNA浓度在3～1000fmol／L范围内成线性，检出限为l fmol／L。 再次，论文基于分子信标识别和荧光纳米粒子标记技术，建立了均相体系中李斯特 列特异性分子信标探针5’端和3’端，成功构建了李斯特菌序列特异性分子信标荧光纳米 探针，建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的新型分析方法。在实验优化条件下，荧 nmol／L。 光强度与目标DNA浓度在1-200nmol／L浓度范围内呈线性关系，检出限O．3 关键词：荧光纳米颗粒，免疫分析，DNA杂交分析，分子信标，荧光探针 III Abstract Abstract methodshavebeen forfood-borne At detection reported pathogen，but present，various the the studied their and work，we applications eachhas present advantagesdisadvantages．In in andDNA analysisby of silica immunoassayhybridization dye．dopednanoparticles method．Weestablishednew fluorescencedetection with sensitive analysis coulpinghigh detectionwith results． method achievedultratrace satisfactory system，and