纳米二氧化硅对rf2ARE信号通路的影响及其作用.pdf

摘要 目的：本论文就Nr也脚信号通路在nm．Si02毒性中的作用及其影响 进行了研究。从细胞和动物水平，探讨了nm．Si02暴露诱导的氧化损 伤、Nr晓／ARE信号通路对n／n．Si02毒效应的防御作用及其机制，为 nm．Si02的人群暴露风险评估提供数据，并对ILrn．Si02的毒性机制进行 了初步探索。 方法：nlll—Si02(10-20nto)和u m．Si02(1-5I，tm)经表征后，①分别 用不同浓度的nm．Si02矛Ngm．Si02暴露A549细胞，检测其细胞活力， 11 确定IC50：再用浓度15 观察其形态学变化，并检测其细胞凋亡、细胞周期、细胞膜电位、SOD 活性、ROS含量及Nrf2脚信号通路相关蛋白的表达。②构建 u 白对照组和阴性对照组，分别用浓度为15g／ml的IIlTI-Si02暴露，检 相关蛋白的表达。③选取IcR小鼠和Nr晓．／．ICR小鼠，分别作为对照 组与实验组，用nnl．Si02或生理盐水暴露14天；测量体重变化与肺、 肝、肾脏器系数；并观察暴露后小鼠肺部hill．Si02的亚细胞定位和小 鼠肺部病理改变；同时检测小鼠肺组织内ROS含量、T．AOC、8-OHdG 含量及Nrf2／ARE信号通路相关蛋白的表达。 结果： 表征显示两种材料粒径合格、无重金属杂质、分散良好、无 明显团聚。Onm．Si02暴露后A549细胞出现明显细胞毒性效应，存在 u 剂量-效应关系，ICso为25．063 g／ml；nm—Si02暴露(1599／m1)后A549 万方数据 细胞凋亡率增加但无细胞周期阻滞效应；细胞内ROS、SOD活性上升； m．Si02暴露后A549 细胞膜电位下降；Nrf2／ARE信号通路被激活。而u 细胞密度无明显变化；同剂量1．tm．SiOz暴露后细胞凋亡率无明显变化， 无细胞周期阻滞效应；SOD活性与细胞膜电位无明显变化；细胞内 通路激活受阻导致HO．1蛋白表达下降，而PERK蛋白表达上调。③ 而实验组小鼠肺组织细胞内发现沉积的nln．Si02。随着暴露时间延长， Nm．／-4,鼠体重逐渐下降，肺、肝脏器系数均下降，各肺叶均存在不 同程度的损伤；肺组织内ROS、8．OHdG含量上升，T-AOC下降； 白表达反馈性上调。 u 结论： nnl．Si02(10．20nm)的毒性大于lam．Si02(1．5m)，能诱 导机体产生氧化损伤。而Nrf2／ARE信号通路的激活可以抵抗nm．Si02 诱导的氧化损伤。Nrf2／ARE信号通路相关蛋白的表达可作为ntn．Si02 人群暴露危害监测潜在的生物标志物。 通路 万方数据 ABSTRACT ontheroleofNrf2／ARE Thisresearchfocused signaling Objectives dataforthe itsinfluence．To onam—Si02’S and provide pathway toxicity