三萜及其苷类：.docVIP

第章 类 三萜是异戊二烯异戊二烯单位的聚合体。在自然界分布广泛，三萜类广泛菌类、蕨类、单子叶、双子叶植物、动物及海洋生物中均有分布，尤以双子叶植物中分布最多五加科、豆科、远志科、桔梗科玄参科及石竹科中药人参、甘草、黄芪、桔梗、柴胡等含有类成分。少数三萜类成分存在于动物体，如羊毛脂中羊毛脂醇，鲨鱼肝脏中鲨烯从海洋生物海参、软珊瑚中也分离出各种类型的三萜类化合物。 三萜类广泛生物活性溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物、抗生育等。由于三萜类化合物生物活性的多样性及重要性，近年来成为天然药物化学研究的一个热点领域，加之现代分离、分析技术的运用，大大加快了类化合物的研究进展。1966～1972年间仅有30个皂苷结构被，2年时间分离鉴定的新皂苷就有1000多研究的一个领域第一节 根据三萜化合物表-1。 表-1 四环三萜和五环三萜类化合物 活性成分 来源 生物活性 羊毛脂甾烷型 茯苓酸 来源于多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核 达玛烷型 人参皂苷Rb1 来源于五加科植物人参的干燥根 中枢神经抑制和安定作用 β-香树脂烷型（齐墩果烷型） 齐墩果酸 来源于木樨科植物油橄榄的叶 降转氨酶作用、促进肝细胞再生 α-香树脂烷型（熊果烷型或乌苏烷型） 熊果酸 来源于木樨科植物女贞的叶 抑菌、抗病毒、抗肿瘤、安定作用 羽扇豆烷型 白桦脂酸 来源于鼠李科植物酸枣 抗肿瘤、抑制HIV-1型感染 第节游离的多有完好的结晶，皂苷的水溶液大多能破坏红细胞，产生溶血现象。肌肉注射，引起组织坏死溶血的可用溶血指数来衡量。在一定条件下使血液中红细胞完全溶解的最低浓度。∶400 000，甘草皂苷为1∶4 000。 皂苷的溶血作用是皂苷红细胞壁上的胆醇结合，破坏血红细胞的正常渗透性，使细胞内但不是所有皂苷都具溶血作用另外有些树脂、脂肪酸、挥发油也能产生溶血现象解皂苷键可采用酸催化水解、酶化开裂等皂苷第节边加边摇，不易得到纯品。 胆甾醇能和皂苷生成复合物，但三萜皂苷与胆甾醇形成的复合物甾体皂苷与胆甾醇形成的复合物稳定。吸附柱色谱法柱色谱色谱不同比例的-丙酮、三氯甲烷-甲醇色谱柱色谱法含水混合有机溶剂 3. 高效液相色谱法应用较多的是能在有机相使用的Sephadex LH-20）。 第节一泡试验取药物粉末1g，加水10ml，煮沸10min后滤过，将滤液强振摇，如产生持久性泡沫（15min以上）即为阳性反应，可能含有皂苷。泡沫试验是皂苷的经典方法。药物液2%红细胞悬浮液液1ml，加1.8%氯化钠溶液1ml及2%红细胞悬浮液1ml，摇匀后放置，数分钟后可见溶液变透明红色，则可能有皂苷的存在。在显微镜下观察，可见细胞溶解情况。三萜苷在无水条件下，与浓酸或Lewis酸颜色变化或荧光。 （1）醋酐浓H2SO4反应（Liebermann - Burchard反应） 三萜三萜皂苷黄-红-紫等颜色变化，最后褪色 （）三氯甲烷-浓硫酸反应（Salkowski反应） 加浓硫酸，现红色或蓝色，（）三氯醋酸反应（Rosen-Heimer反应）　 （）五氯化锑反应（Kahlenberg反应） 将样三氯甲烷或醇点于滤纸上，喷以20%五氯化锑的三氯甲烷溶液（不含乙醇和水），60℃～70℃加热，显蓝色、灰蓝色或灰紫色斑点。纸色谱纸色谱紫外光谱（UV） 齐墩果烷三萜类化合物用UV光谱判断双键类型。1．一个孤立双键 仅在205～250nm处有微弱吸收。 2．α,β-不饱和羰基（-C=C-C=O）3．异环共轭双烯 在240nm、250nm、260nm有最大吸收；同环共轭双烯则在285nm有最大吸收。 此外，C11氧代，△12-齐墩果烷型化合物可用紫外光谱判断C18-H构型。若C18-H为α-构型，最大吸收为242～243nm，若C18-H为β-构型，最大吸收为248～249nm。 （二）红外光谱（IR）IR光谱测定可以区别β-香树脂烷型、α-香树脂烷型和四环三萜类成分。在区域1392～1355cm-1和1330～1245cm-1范围内，由于类成分的基本碳架不同而表现出来的吸收峰也不同。谱（）1．游离三萜类化合物　主要采用电子轰击质谱（EI-MS）。 （1）齐墩果烷型或乌苏烷型：其EI-MS显示分子离子峰[M+]及失去CH3、OH或COOH等碎片峰。若分子中有C12双键，具环己烯结构，则C环易发生RDA裂解，出现含A、B环和D、E环的碎片离子峰。 （2）羽扇豆烷型：可出现失去异丙基产生的M-43的特征碎片离子峰。 2. 三萜皂苷 目前常用场解析质谱（FD-MS）和（正或负离子）快原子轰击质谱（FAB-MS），这两种质谱不依赖样品的挥发就可得到皂苷的准分子离子峰[M+H] +、[M+Na] +、[M+K] +等，负离子FAB-MS谱给出[M-H] –峰。同