右归丸对肾阳虚干预效应的血清差异蛋白质组研究.pdf

摘要 for 目的：采用蛋白质组学技术中的相对和绝对定量同位素标记(isobaric Tags Absolute Relativeand 接受右归丸治疗一月前后比较的血清差异表达蛋白，并对筛选到的差异表达蛋白 进行生物信息学分析，阐释右归丸治疗肾阳虚证的疗效机制。 方法：根据中医内科学权威诊疗专家诊断及肾阳虚证评定量表判定，选取典型肾阳 虚证患者4名给予右归丸常规剂量口服治疗一个月，并于治疗前后分别采集患者外 周血，样品处理后取血清进行高丰度蛋白去除并提取蛋白，然后进行蛋白质的变性 还原，并于蛋白质彻底裂解成肽段后进行iTRAQ标记和Q-Exactive质谱仪鉴定， 质谱分析原始数据用软件Mascot2．2和Proteome 库鉴定及定量分析，筛选并鉴定出差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行生物信息 学分析。 结果：此次试验最终共鉴定出血清蛋白数236种，其中达到定量信息的为171种。4 例患者治疗后与治疗前相比较均有差异表达蛋白，4例患者中均表达差异且表达方 向一致的蛋白有6种，上调者占4种，下调者2种。经查库鉴定发现这6种差异表达蛋 ofGenesand Encyclopedia 白共参与22种生物学过程和1条KEGG通路(Kyoto Genomes．京都基因与基因组百科全书)，对这些差异表达蛋白进行G0及KEGG通路 C3，C3)、载脂蛋白c—IⅡ 注释分析。根据实验结果推测：补体C3(Complement (apolipoprotein E，APOE)，可能与右归丸治疗。肾 糖基化蛋白，Cys-C)、载脂蛋白E(apolipoprotein 阳虚证所发挥的疗效密切相关。 关键词：肾阳虚证；右归丸；iTRAQ；差异表达蛋白；蛋白质组学 万方数据 Screeni for ng di fferentl y expressedserum i protensof Kidney-yang after deficiency Regulated by PiI Is Yougui Abstract Objectire：Toscreen differentlyexpressedserum proteinsofthe Kidney—yang a8sociated detlclency with Pillswho Yougui takesthemfor onemonthbviTRAQ technicaland the anal