小胶质细胞介导兴奋性氨基酸在大鼠da1神经损伤中的作用.pdf

Ilill e III IIIIIII I I f fl| ＼1901359 目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………7 研究论文小胶质细胞介导的兴奋性氨基酸在大鼠DAI神经损伤中的作 用 前言……………………………………………………………………．．8日U舌……………………………………………………………………．．8 材料与方法 …………………………………………………………．8 结果……………………………………………………………………141q日；寸《…………．…．…．…．．．………．…．………．…．……………．．．．…．1‘} 附图……………………………………………………………………．17 附表……………………………………………………………………25 讨论……………………………………………………………………30 结论……………………………………………………………………33 参考文献………………………………………………………………34 综述谷氨酸和神经兴奋毒性………………………………………………38 致谢…………………………………………………………………………53 个人简历……………………………………………………………………54 神经损伤中的作用 摘 要 axonal 目的：弥漫性轴索损伤(diffuse 性特殊外力，产生加速运动时，在剪应力的作用下，脑内发生的以神经轴 索肿胀、断裂为特征的一系列的病理生理变化，可单独出现也可伴随其他 病理改变。典型的表现为意识障碍，临床诊断较困难且预后差。已有研究 表明，DAI造成外伤后的脑功能障碍不仅是由于最初的机械外力等作用所 致的原发性损伤，很大程度上与损伤后发生的复杂的神经元“二次打击” (神经元继发性损伤)有关口‘21。 前期实验已经观察到大量的小胶质细胞在DAI后被激活，且小胶质细 胞介导的炎症反应及呼吸爆发在DAI后继发性神经损伤中发挥作用。但是 神经损伤的机制不仅限于直接的细胞因子的作用，小胶质细胞激活后产生 的毒性作用更为重要。研究显示小胶质细胞在中枢神经系统中不仅起支持 和营养作用，同时作为中枢神经系统内兴奋性氨基酸代谢的重要场所b3， 小胶质细胞的激活可释放大量的兴奋性氨基酸，同时兴奋性氨基酸也可进 一步激活小胶质细胞。而兴奋性氨基酸过多产生的兴奋毒性作用在许多神 经系统疾病中可以导致神经损伤，包括炎症、缺血及神经退行性变心3。而 小胶质细胞在DAI模型中介导的兴奋性氨基酸在神经损伤中的作用尚不 ’ 明确。 本实验旨在参照1994年嫡1MarmarouA等的方法建立大鼠DAI模型， 并给予小胶质细胞特异性抑制剂米诺环素进行治疗，采用小胶质细胞特异 性标记物，通过免疫组织化学方法，观察DAI后激活的小胶质细胞分布 特点及米诺环素对小胶质细胞激活的抑制作用。并通过高效液相色谱对脑 组织中的兴奋性氨基酸进行定量分析，观察DAI后兴奋性氨基酸的变化 及米诺环素对兴奋性氨基酸变化的影响，探讨兴奋性氨基酸的促损伤作 用。以期为法医学实际检案工作中对DAI损伤的客观评价提供理论依据， 并为临床治疗提供新思路。 中文摘要 24h、48h、72h、7d。参照MarmarousA等的方法制备大鼠脑DAI模型。 假手术组大鼠给予手术及打击前处理，但不予打击；损伤组和治疗组 给予打击；打击后治疗组腹腔注射米诺环素(45mg／kg)，之后每天一次， 直至动物被处死。损伤组在与治疗组相同时间点腹腔注射同剂量的生理盐 水。根据打击后按不同时间给予10％水合氯醛麻