趋磁菌AMB-1超氧化物歧化酶Fe-SOD在大肠杆菌中的表达及其生理活性的研究.pdfVIP

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2012年第12期 趋磁菌 AMB-1 超氧化物歧化酶 Fe-SOD 在大肠杆菌中 的表达及生理活性研究 1,2 1,2 1,2 3 王齐磊   李相前   徐琳寓   薛业敏 1 2 ( 淮阴工学院生命科学与化学工程学院,淮安 223003 ; 南京大学淮安高新技术研究院,淮安 223003 ; 3 南京师范大学金陵女子学院,南京 210097) 摘 要 : 超氧化物歧化酶 (SOD )可以减轻超阳阴离子O2-对细胞的毒害作用,提高菌体的抗氧化能力,从而改善菌株的生 理状态。利用PCR 技术,将趋磁菌AMB-1 的超氧化物歧化酶基因fesod 克隆至原核表达载体pET-20b (+ ),并在E. coli BL2 1 (DE3 ) 有效表达。重组菌株BL21 (DE3 ) / (pET-20b-fesod-histag )在0.6 mmol/L IPTG 诱导浓度下进行发酵培养,在生长前期2-14 h 生长 速率优于对照组E. coli BL21 (DE3 ) / (pET-20b )。通过亲和层析柱纯化后,重组酶蛋白纯度达电泳均一,超氧化物歧化酶 fesod 活 性最适作用温度为25 ℃,在25 ℃和45 ℃下酶热稳定较好,pH4.2-8.2 之间酶活力稳定。趋磁菌AMB-1 来源的Fe-SOD 作为一种抗 氧化酶,在大肠杆菌中的有效表达从一定程度上改善了宿主菌的生长情况。 关键词 : 超氧化物歧化酶 (SOD ) 克隆表达 生理活性 酶学性质 趋磁菌AMB-1 - Expression of Superoxide Dismutae Fe SOD of Magnetospirillum - magneticum AMB 1 in Escherichia coli and Its Enzymatic Characterization Wang Qilei1,2 Li Xiangqian 1,2 Xu Linyu1,2 Xue Yemin3 1 2 - (Faculty of Lif e Science Chemical Engineering ,Huaiyin Institute of Technology ,Huai ’an 223003 ;Huaian High Tech Research Institute 3Dep

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