犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及抗病毒活性的测定.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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犬α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及抗病毒活性的测定.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 6 :216-220 犬 α干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性的测定 1 1 2 1 1 1 李皓洋胡小元易咏竹杨鑫张志芳李轶女（1. 中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081 ；2. 中国农业科学院蚕业研究所，镇江 212018）摘要：犬α干扰素（CaIFNα）在犬病防治过程中应用广泛。旨在开发一种高效的CaIFNα表达方法。首先按家蚕密码子的偏好性对GenBank 中的一个CaIFNα基因进行了优化与合成，将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393 中，并与亲本病毒BmBacmid 共转染家蚕细胞进行细胞内重组。得到的重组病毒用于感染家蚕幼虫，收集发病幼虫的蚕血淋巴用于CaIFNα检测。采用细胞病变抑制法在MDCK-VSV*GFP 系统中测定其抗病毒活性。结果显示家蚕表达的CaIFNα能有效抑制VSV*GFP 在细胞内的复制，其抗 6U/mL。病毒活性不低于1.78×10 关键词：犬α干扰素；家蚕杆状病毒表达系统；抗病毒活性检测 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.06.022 - Expression of Canine Interferon Alpha in Silkworm baculovirus Expression System and the Antiviral Activity Assay 1 1 2 1 1 1 Li Haoyang Hu Xiaoyuan Yi Yongzhu Yang Xin Zhang Zhifang Li Yinü （1. Biotechnology Research Institute ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Beijing 100081 ；2. The Sericultural Research Institute ， Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Zhenjiang 212018 ） Abstract: Canine interferon alpha（CaIFNα）was widely used in the prophylaxis and cure of canine diseases. The purpose of this study is to develop an efficient method to express CaIFNα. A canine interferon alpha gene in GenBank was optimized according to the codon bias of silkworm and synthesized, and then cloned into the baculovirus transfer vector pVL1393 to construct the recomb