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酶学及酶工程 Enzymology and Enzyme Engineering 第二章 酶的结构与功能 第五节 酶的活性调控及变构（别构）效应 一、 酶活性调节的多样性 生命过程表现了它内部变化历程的有序性。这种有序性是受多方面因素调节和控制的，酶活性的调节控制又是各种生命现象调节控制的主要方式之一。 任何不受控制的过程对生命都是灾难性的。通过反馈机制对过程进行有效的调节控制，对任何生命以及类似的事物都是必须的，这是不以人的意志为转移的客观规律。 酶活性的调节控制有多种方式。 1. 酶的生物合成调节 酶的相关基因表达，即其生物合成的调节控制将调节该酶的数量，从而调节控制了该酶的总活性。 β—半乳糖苷酶是乳糖代谢中一个酶，它的生物合成平时是处于被阻遏状态。当乳糖存在时，通过对表达的调节消除了该阻遏作用，于是此酶受乳糖的诱导而合成。 脂肪酸合酶的表达受摄食中脂肪的抑制，而受碳水化合物的激活。 2. 激素调节 这种调节也和有活性酶的数量有关。但调节方式有所不同。 乳糖合成酶有两个亚基，催化亚基和修饰亚基。催化亚基本身不能合成乳糖，只催化半乳糖以共价键的方式连接到蛋白上形成糖蛋白。修饰亚基和催化亚基结合后，改变了催化亚基的专一性，可以催化半乳糖和葡萄糖反应生成乳糖。 修饰亚基的水平是由激素控制的。分娩后，激素水平急剧变化导致修饰亚基大量合成，它和催化亚基结合，大量合成乳糖。 3. 共价修饰调节 这种调节方式是通过酶催化进行的。 1）在一种酶分子上，通过其它酶催化共价地引入一个基团，从而改变它的活性。引入的基团还可以被第三种酶催化除去，再改变活性。 例如，磷酸化酶的磷酸化和去磷酸化；大肠杆菌谷氨酰胺合成酶的腺苷酸化和去腺苷酸化就是以这种方式调节它们的活性。 2）限制性蛋白酶水解是另一种高特异性的共价修饰调节系统。 生物体内有些新生蛋白是以无活性的前体形式存在的，生理需要时通过限制性水解作用使前体转变为具有生物活性的蛋白质或酶，如消化蛋白酶酶原激活、血液凝固等。 4. 抑制剂和激活剂的调节 抑制剂的调节指酶活性受到体内大分子或小分子作用而抑制酶的活性。大分子如胰脏的胰蛋白酶抑制剂；小分子如2，3—二磷酸甘油酸，是磷酸变位酶的抑制剂。激活剂的调节指酶活性受到体内离子、小分子化合物或较大的生物分子的激活，从而提高酶的活性。金属离子对酶的激活很常见；小分子化合物如2，6—二磷酸果糖是磷酸果糖激酶有效的激活剂；生物分子如cAMP对蛋白激酶的激活等。 5. 变构调节 变构调节是特殊形式的酶的反馈抑制调节。 如某一合成途径为A→ B→ C→ D→ E→ F 产物F是该途径中早期酶(如A到B)的变构抑制剂。变构抑制剂与酶的结合引起酶构象的改变，使底物结合部位的性质发生变化并降低了酶的催化活性，从而对这一合成途径加以反馈抑制。 变构酶大多为寡聚蛋白，因此变构调节的机理涉及到亚基之间的相互作用。如将变构酶拆分成单亚基，即失去变构调节活性，但仍可能保持酶的催化活性。 二、通过酶催化的共价修饰调节 1.通过不可逆改变共价结构的活性调节。 1）消化蛋白酶的酶原激活 酶原激活是非活化的酶原被特异的蛋白酶限制性水解，切去某段肽或断开某个肽键而转变为活性的酶。如消化蛋白酶无活性的酶原在小肠里被其他蛋白水解酶限制性地切去一个小肽，而活化成为有活性的消化蛋白酶。 出于保护机制,新生的蛋白酶是酶原，没有活性。胰蛋白酶原N端被肠肽酶切去一个6肽而激活，并进一步激活其它蛋白酶。 2）凝血途径:信号的级联放大 血液凝固是由十几种蛋白因子参加的级联式酶促激活反应，其中多数为限制性蛋白水解酶。 在凝血过程中经过系列级联放大激活反应激活凝血酶原，生成活性凝血酶。 凝血酶催化可溶性纤维蛋白质原水解为不溶性的纤维蛋白；并催化激活血纤维交链酶。 纤维蛋白经交链酶催化聚集成网状细丝，网住血液的各种成分，并收缩成血块，封闭破损的血管。此种方式的特点是快速反应，信号被迅速放大。 凝血过程 2.通过可逆改变共价结构的活性调节 控制糖原代谢途径的磷酸化酶的活性调节：b需依赖AMP才有活性，a不需依赖AMP即有活性。由激酶和磷酸酶催化相互转换。 生理意义特点 由于此类调节方式是酶催化的，活性酶数量能迅速发生变化，造成起始信号被迅速放大。 可逆共价活性调节方式中酶的活性形式和非活性形式为连续互变状态，对生物代谢环境的变化可以随时应答，比不可逆共价活性调节更具灵活性。 三、变构调节（allostery) 1. 协同性（cooperativity） 配体与酶可逆结合使酶构象变化导致酶活性改变称为变构调节，有此种性质的酶称为变构酶(allosteric enzymes)，以前也曾称为别构酶。 变构酶具有多个配体结合部位，在配体结合过程中结合部位之间存在的相互作用，