微生物第一章a技术方案.ppt

1、细胞壁 6）细胞壁缺陷细菌： （2）原生质体（protoplast） 在人为条件下，用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而 抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的，圆球形、 对渗透压变化敏感的细胞，一般由革兰氏阳性细菌形成。 特点： 对环境条件变化敏感，低渗透压、振荡、离心甚至 通气等都易引起其破裂； 有的原生质体具有鞭毛，但不能运动，也不被相应 噬菌体所感染； 在适宜条件（如高渗培养基）可生长繁殖、形成菌 落，形成芽孢。及恢复成有细胞壁的正常结构。 比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质，是 研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。 1、细胞壁 6）细胞壁缺陷细菌： （3）球状体(sphaeroplast) ，又称原生质球 采用上述同样方法，针对革兰氏阴性细菌处理后而获得的 残留部分细胞壁（外壁层）的球形体。与原生质体相比， 它对外界环境具有一定的抗性，可在普通培养基上生长。 1、细胞壁 6）细胞壁缺陷细菌： （4）支原体(Mycoplasma) 在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的 原核生物。因它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇，? 所以即使缺乏细胞壁，其细胞膜仍有较高的机械强度。 （二）大小 2、测量方法 显微镜测微尺 显微照相后根据放大倍数进行测算 （二）大小 2、细菌大小测量结果的影响因素 个体差异； 干燥、固定后的菌体会一般由于脱水而比活菌体缩短1/3-1/4； 染色方法的影响，一般用负染色法观察的菌体较大； 幼龄细菌一般比成熟的或老龄的细菌大； 环境条件，如培养基中渗透压的改变也会导致细胞大小的变化。 （三）细胞的结构 特殊构造：部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造 一般构造：一般细菌都有的构造 （三）细胞的结构 1、细胞壁 1）概念： 细胞壁（cell wall）是位于细胞表面，内侧紧贴细胞膜的 一层较为坚韧，略具弹性的细胞结构。 （三）细胞的结构 1、细胞壁 2）证实细胞壁存在的方法： （1）细菌超薄切片的电镜直接观察； （2）质、壁分离与适当的染色，可以在光学显微镜下看到细胞壁； （3）机械法破裂细胞后，分离得到纯的细胞壁； （4）制备原生质体，观察细胞形态的变化； （三）细胞的结构 1、细胞壁 3）细胞壁的功能： （1）固定细胞外形和提高机械强度； （2）为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需； （3）渗透屏障，阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质 （分子量大于800）进入细胞，保护细胞免受溶菌酶、 消化酶和青霉素等有害物质的损伤； （4）细菌特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的 敏感性的物质基础； （三）细胞的结构 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： 简单染色法 正染色 革兰氏染色法 鉴别染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 死菌 姬姆萨染色法 负染色： 荚膜染色法等 细菌染色法 活菌：用美蓝或TTC（氧化三苯基四氮唑）等作活菌染色 （1）细菌染色法 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： （1）革兰氏染色 C.Gram（革兰）于1884年 发明的一种鉴别不同类型 细菌的染色方法。 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： （1）革兰氏染色 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染；1min 2、用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。1min 3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。 20-30s 4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色。 1min 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： （1）革兰氏染色 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： （1）革兰氏染色 表1-1 革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁成分的比较 1、细胞壁 4）革兰氏染色与细胞壁： （2）革兰氏阳性细菌的细胞壁 特点：厚度大（20~80nm） 化学组