Survivin启动子SNPs多态性和结直肠癌关系的研究.doc

目  录  1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2 3  Survivin 启动子 SNPs 多态性与结直肠癌关系的研究???1 中文摘要?????????????????????1 英文摘要?????????????????????4 前言???????????????????????7 材料与方法????????????????????10 结果???????????????????????19 讨论???????????????????????27 结论???????????????????????34 参考文献?????????????????????35 英汉缩略词对照表?????????????????35 致谢???????????????????????40 Survivin 基因启动子区域多态性研究现状（综述） ?????????????????????????41 2 Survivin 启动子 SNPs 多态性与结直肠癌关系的研究 摘 要  目的：探讨在中国四川省泸州市汉族人群中，survivin 基因启动子区 -31G/C、-141G/C、-241T/C 单核苷酸多态性位点(SNPs)多态性与结直肠癌 易感性，以及与结直肠癌患者临床病理相关参数间的相关性；研究分析 -31G/C 多态性与结直肠癌患者耐药相关标记的关系。方法：随机选取 2009-2012 年四川省泸州医学院附属医院 206 例汉族结直肠癌患者作为病 例组和相似年龄性别构成的 129 例健康汉族人作为对照组，抽取外周静脉 血，使用酚-氯仿-异戊醇法提取基因组 DNA，采用 PCR 技术扩增目的基因 片段，利用限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism, RFLP）、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳以及银染技术分别确定 survivin 基因 启动子-31G/C、-141G/C、-241T/C 位点基因型。详细收集结直肠癌患者临 床病理资料（肿瘤部位、大体类型、组织学类型、分化程度、浸润深度、 淋巴结转移情况）；收集病例组结直肠癌肿瘤组织，免疫组化技术检测肿瘤 组织中耐药相关标记的表达。采用二项分布统计分析泸州地区汉族人群中 survivin 基因启动子-31G/C、-241T/C 多态性位点基因型频率分布与 NCBI 数据库公布全球数据间的差异；采用卡方检验分析 SNPs 多态性与结直肠 癌的相关性及与肿瘤临床病理学参数的关系；采用秩和检验分析-31G/C 不 同基因型与肿瘤耐药相关标记物的关系；所有分析均采用 SPSS18.0 软件进 行，以 P0.05 具有统计学意义，以相对危险度比值比（odds ratio，OR） 和 95%可信区间（95% confidence interval，95%CI）表示基因型和等位基 1 因与结直肠癌的相关性。结果：（1）病例组与对照组-31G/C 和-241T/C 位 点检出基因多态性，-141G/C 位点未检测到 G 等位基因；对照组-31G/C 等 位基因频率与 NCBI 数据库中公布的全球人、亚洲人、欧洲人、非洲人分 布间有显著性差异（P＜0.05）,-241T/C 等位基因频率与 NCBI 数据库中公 布的全球人基因频率分布无显著差异（P＞0.05）。（2）病例组与对照组 -31G/C 多态性位点 CC 与 GG+GC 基因型、GG 与 CC+GC 基因型以及 C 与 G 等位基因的频率总体分布差异有统计学意义（P=0.002、P=0.026）。 CC 基因型与结直肠癌患病风险关联（ OR=2.129,95%CI=1.303-3.479）。G 等位基因是结直肠癌的保护性因素。-241T/C 多态性位点各基因型及等位 基因频率总体分布差异无统计学意义，与结直肠癌患病风险无相关性。 3） 未发现-31G/C 位点与结直肠癌发生部位（直肠、结肠）、组织学类型（腺 癌、粘液腺癌）、分化程度（高、中-低）、浸润深度（非全层、全层）、淋 巴结转移（无、有）等临床病理参数间的显著性差异。（4）-31G/C 位点各 基因型与肿瘤耐药相关标记表达间未发现相关性。结论：（1）泸州地区汉 族人群 survivin 启动子-31G/C 等位基因频率与 NCBI 数据库中公布的全球 人、亚洲人、欧洲人、非洲人分布间有显著性差异,-241T/C 等位基因频率 与 NCBI 数据库中公布的全球人基因频率分布无显著差异。（2）Survivin 启动子-31G/C 多态性位点 CC 与 GG+GC 基因型、GG 与 CC+GC 基因型以 及 C 与 G 等位基因的频率在结直肠癌病例组与正常人群对照组中总体分布 差异有统计学