第7章 食药用菌与酶剖析.ppt

漆酶菌株的初筛 漆酶高产菌株培养条件的优化 * 第7章 食药用菌与酶 Section 7 Edible fungi and Enzyme 酶与食药用菌的生长发育 纤维素酶 cellulase 半纤维素酶 hemicellulase 木质素酶ligninase 一、酶与食药用菌的生长发育 （一）酶(Enzyme)的定义：酶是由活细胞产生的具有催化功能的蛋白质。 Beadle Center, University of Nebraska （二）食药用菌的生长特点： 利用树木（包括树枝、树叶）、秸秆、棉籽壳等；这些原料的主要成分是纤维素、木质素、半纤维素和果胶质等。 9-15 35-36 20-25 稻草 18-32 15-35 30-36 秸秆 29-32 22-25 37-48 棉籽壳 20-30 10-30 40-60 木材 木质素 半纤维素 纤维素 原料名称 不同原料的木质纤维素含量（%） 图1 木质纤维素结构示意图 图2 纤维素的结构示意图 纤维素（cellulose）、是由许多葡萄糖基相互以糖甙键连接而成的线性高分子，纤维素的重复单元是纤维素二糖（cellobiose） 图3 半纤维素的结构示意图 半纤维素（hemicelluloses）是由木糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖等多糖基组成的一种聚合物。具有多而短的支链，主链上一般不超过150－200个糖基。 图4 木质素的基本组成单元 木质素（lignin）是一种具有芳香族特性，以苯丙烷为结构单元，非结晶性的，三维高分子网状化合物。重复结构单元缺乏规律性和有序性。 果胶(Pectin)是一组聚半乳糖醛酸。它具有水溶性,工业上即可分离,其分子量约5万一30万。在适宜条件下其溶液能形成凝胶和部分发生甲氧基化（甲酯化，也就是形成甲醇酯）,其主要成分是部分甲酷化的a(l,4)一D一聚半乳糖醛酸。残留的羧基单元以游离酸的形式存在或形成铵、钾钠和钙等盐。 （三）食药用菌的酶系统： 纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶 二、纤维素酶 cellulase (1)组分： 纤维素酶 内切β-1.4葡聚糖水解酶，俗称Cx酶——随机内切纤维素大分子中的β-1.4糖苷键，产物为纤维糊精，纤维寡糖 外切β-1.4葡聚糖水解酶，俗称C1酶 β-1.4葡聚糖葡萄糖水解酶——作用于纤维素分子非还原性末端的β-1.4糖苷键，产物为葡萄糖 β-1.4葡聚糖纤维二糖水解酶——作用于纤维素分子非还原性末端的β-1.4糖苷键，产物为纤维二糖 β-1.4葡萄糖苷酶，俗称C1酶——水解纤维二糖，纤维寡糖的β-1.4糖苷键，产物为葡萄糖 cellobiose Cellulose crystal （2）结构和性质： 胞外酶 pH：酸性纤维素酶：木腐菌。pH4.5-5.5 碱性纤维素酶：鬼伞、草菇等。pH 7-10 温度：40-60℃ 分子量：45000-76000； （3）作用方式：各组分酶协同作用 结晶纤维素 可反应的纤维素=[葡萄糖]n [葡萄糖]n 纤维二糖 葡萄糖 图4 纤维素的作用机理 β-葡萄糖苷酶 内切葡聚糖酶 内切葡聚糖酶 外切葡聚糖酶 （4）纤维素酶活力的测定方法 酶活力单位（国际单位）：在特定条件下，每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。 滤纸糖化力法：测定总纤维素酶活力 CMC糖化法：测定外切β-1，4-葡聚糖的活力和内切酶活力的总和。 CMC液化力法：测定内切β-1，4-葡聚糖酶的活力。 祥见：《酶制剂生产技术》，科学出版社，孙俊良，2007年1月 （5）纤维素酶的生产菌株：绿色木霉、康氏木霉 成分主要为内切β-1.4葡聚糖水解酶Cx和C1外切β-1.4葡聚糖水解酶，俗称C1酶 (6) 纤维素酶的应用 大豆加工中作用：促进大豆脱皮，增加水溶性蛋白的得率； 淀粉加工中的作用：缩短加工时间，增加得率； 果汁加工中的作用： 促进汁液澄清； 饲料添加剂：提高饲料的利用率； 半纤维素酶 hemicellulase （1）半纤维素的组成：木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、乳糖和糖醛酸等混合组成的杂多糖；木聚糖是主要成分； （2）半纤维素酶主要酶种：内切1，4-β-木聚糖酶、外切β-1，4木糖苷酶等； （3）作用方式：多种酶协同作用。先由内切1，4-β-D-木聚糖酶切成木寡糖，再由外切β-木糖苷酶分解成木糖；同时需要α-L-阿拉伯糖苷酶、α-D-葡萄糖醛酸酶、乙酸酯酶和 阿魏酸酯酶等的参与木糖与侧链取代基之间的糖苷键，以提高降解效率。 （4）木聚糖酶(xylanase)的结构与性质 木聚糖的结构 性质 Xylanase struction 内切1，4-β