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一、怎样进行酵母菌的计数? 提示:对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数 量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。 * 探究: 培养液中酵母菌 种群数量的变化 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素 1、酵母菌的繁殖方式主要是: 2、酵母菌的呼吸方式是: 兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸) 回顾思考: 出芽生殖 3、酵母菌的培养条件要注意那些问题? 比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。 酿酒和做面包都需要酵母菌。这些酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养。培养液中酵母菌种群的增长情况,与发酵食品的制作有密切关系。 培养液中酵母菌种群数量开始一段时间是“J”型增长,由于营养物质的消耗,有害代谢产物的积累,PH值的改变,种群数量呈“S”型增长。 探究:培养液中酵母菌种群数量的变化 问题:培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?温度会影响酵母菌的生长吗?营养成分会影响酵母菌的生长吗? 作出假设 根据前面所学的知识,针对这一问题作出假设: 讨论探究思路 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(2mm×2mm方格)、滴管、显微镜等,都由老师提供。 在制订计划前,你需要思考以下问题,并与同学讨论。 实验设计???将9支试管分成ABC三组,每组3支。A组为实验组,装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃。B组装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度5℃,与A组形成温度条件对照。C组不装培养液,只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃,与A组形成营养条件对照。 实验操作: (1)、配制无菌马铃薯培养液和酵母菌母液; (2)、预先设计分装。先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培养液到A组和B组试管,用另一支10mL刻度吸管吸取10mL无菌水到C组试管。待分装完毕,每支试管加塞后把试管扎成捆后,然后用记号笔注明培养基的名称、组别、日期。 (3)、用高压蒸汽灭菌锅灭菌; (4)、接种菌种:用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每支试管中加入。(注意滴加量不要太多,避免初始菌数过多。) (5)、培养:将 A、C试管置于 28℃的恒温箱中培养。将 B试管置于5℃的恒温箱中培养。(5℃的恒温箱可由某些型号冰箱保温室设定5℃时代替。) (6)、计数和记录:每天取样时间大体一致,每次每组按序号取一支试管。计数过程中一定要遵守无菌操作规范,取样的吸管要干净且分开使用,每次取样前要试管振荡摇匀。显微镜下进行细胞计数后,立即将数据填到记录表格中。 分析结果,得出结论 将所得数值用曲线图表示出来,分析实验结果是否支持你所做的假设。 酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈 “S”型增长,但之后会下降。温度、营养成分会影响酵母菌种群数量的变化。 探究的结论: 介绍:血球计数板的构造 1、血球计数板:是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台,中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。 化 放大后的方格网计数室 I H G F E D C B A 25×16 16×25 2、方格网的构成: 方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,计数室通常有两种规格:一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。 3、使用方法: 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片,将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内,加盖盖玻片。 5、单位换算: 以1mm×1mm为例,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体
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