Ml和M2型肿瘤相关巨噬细胞对胆囊癌细胞增殖、凋亡和VEGFC蛋白表达影响.pdfVIP

目录 英文略缩词表01 摘要……………………………………………………………………………03 Abstract………………………………………………………………………………04 前言06 一、材料和方法……………………………………………………………..…….…08 二、结果………………………………………………………………………..……21 三、讨论………………………………………………………………………….….25 结论……………………………………………………………………………..……28 参考文献……………………………………………………………………………..29 致谢…………………………………………………………………………………..31 综述肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤淋巴转移的研究进展…. ……………………. 32 参考文献…………………………………………………………………..…………37 万方数据 1 英文缩略词表 英文缩略 英文全称 中文全称 TAMs Tumor-associated macrophages 肿瘤相关巨噬细胞 DMEM Dulbeccos modified Eagles medium 达尔伯克改良的伊格尔（氏） RPMI-1640 Roswell Park Memorial Institute RPMI-1640 培养基 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 PVDF polyvinylidene difluoride 聚偏氟乙烯 PMA phorbol myristate acetate 佛波酯 IFN-γ interferon-γ 干扰素-γ LPS Lipopolysaccharid 脂多糖 IL-4 interleukin-4 白介素-4 VEGF-C vascular endothecial growth factorC 血管内皮生长因子-C PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 BSA Bovine Serum Albumin 牛血清白蛋白 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 g（rcf） relative centrifugal force 相对离心力 h hour 小时 min minute 分钟 Amp Ampicillin 氨苄青霉素 Ep Eppendorf tube 离心管 IOD Integrated Optical Density 累积光密度 M Mol/l 摩尔/升 NS Normal Saline 生理盐水 OD Optical Density 光密度 PMSF phenylmethylsulfonyl fluoride 甲基磺酰氟 rpm（r/min） Revolutions per minute 每分钟转环数 SPSS Statistical Product and Service Solution 统计产品与服务解决方案 万方数据 2 TMP Trimethoprim 甲氧苄氨嘧啶 w Week 周 ddH2O double distilled H2O 双蒸水 DC Dendritic Cells 树突状细胞 CIK cytokine-induced killer 细胞因子诱导的杀伤细胞 万方数据 3 Ml和 M2型肿瘤相关巨噬细胞对胆囊癌细胞 增殖、凋亡和 VEGF-C蛋白表达的影响 摘要 目的：探讨体外诱导的Ml型和M2 型巨噬细胞对胆囊癌细胞 GBC-NOZ的 增殖、凋亡和 VEGF-C 蛋白表达的影响。 方法：用佛波酯（PMA）诱导人单核细胞系（THP-1）成巨噬细胞，再利用 干扰素-γ（IFN-γ）、脂多糖（LPS）和白介素-4（IL-4）分别诱导成 Ml 型巨 噬细胞和 M2 型巨噬细胞，并分别应用单克隆抗体 CD80 和 CD163 进行流式细 胞表型鉴定。通过体外建立 transwell 共培养体系将巨噬细胞、单核细胞 THP-1 和胆囊癌细胞 GBC-NOZ共培养，分为 M1组、M2 组、THP-1 组、空白对照组。 通过 CCK-8 法检测四组 GBC-NOZ 细胞增殖能力并建立生长曲线， Annexin V/PI 双染凋亡法检测四组 GBC-NOZ 细胞凋亡情况，蛋白质印迹法（Western Bloting）检测胆囊癌细胞 GBC-NOZ VEGF-C 蛋白水平的变化。 结果