动物胚胎移植技术及体外受精要点.ppt

第五章动物胚胎工程技术及体外受精 现代生物技术 家畜育种领域 繁殖生物技术 分子生物技术 人工授精技术 胚胎工程技术 超数排卵和胚胎移植 胚胎性别鉴定 体外受精 胚胎分割 克隆技术 试管婴儿 体外受精联合胚胎移植技术（IVF） 1978年英国专家steptoe和Edowrds定制了世界上第一个试管婴儿 1978年7月25日世界第一例试管婴儿Louis Brown在英国诞生。IVF的最早阶段妊娠成功率只有2.94％。 大陆首例试管婴儿郑萌珠于1988年3月10日上午8点56分在北京医科大学第三医院诞生 第一节 胚胎工程技术 胚胎移植 胚胎融合 胚胎分割 胚胎的冷冻保存 早期胚胎培养 胚细胞核移植 受精过程 ①分解放射冠的卵泡细胞 ②水解局部透明带 ③ 精子细胞核和部分胞质进入卵母细胞 卵裂及胚泡形成（第一周） 卵裂(cleavage) 受精卵由输卵管向子宫方向运行，并不断进行细胞分裂，受精卵早期的细胞分裂称卵裂；卵裂产生的子细胞呈球形，称卵裂球（blastomere） 桑椹胚（morula） 受精后第3天，形成了12~16个卵裂球组成的实心胚，形似桑椹，称桑椹胚 胚泡形成 受精后第4~6天桑椹胚细胞继续分裂，细胞间开始出现小腔隙，并逐渐汇合成一个大腔，桑椹胚转变为中空的泡状，称胚泡（blastocyst），胚泡由三部分组成： 胚泡 滋养层 胚泡腔 内细胞群 极端滋养层 一、胚胎移植 受精卵移植 把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫中冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内，使之继续发育成新个体的技术 供体 提供胚胎的动物 受体 接受和孕育胚胎的动物 初始阶段 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内，分别获得仔兔2只 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左右 发展阶段 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功，之后日、美采用非手术法移植成功，胚胎移植成功率达70-80% 胚胎移植的历史 实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司，1973年牛冻胚移植成功（英） 实用化研究阶段 1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日德广泛开展，克隆羊诞生 胚胎移植的历史 1.胚胎移植的生理学基础 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外源激素作用下，每个发情期的卵泡发育和排卵数可达数十个 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育 早期胚胎处于游离状态 胚胎发育不存在免疫问题 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组织联系 胚胎的遗传性不受受体的影响 2. 胚胎移植的基本原则 胚胎移植前后所处的环境的同一性 供体和受体在分类学上的相同属性 动物生理上的一致性：受体和供体在发情时间上的同期性 动物解剖位置上的一致性：空间环境的一致性 胚胎的发育期限：必须处于周期黄体期内 胚胎的质量：胚胎必须是正常的，并在处理过程中不受不良因素的影响 3、胚胎移植 供受体的选择与管理 供体的超数排卵处理和配种 受体的同期发情处理 胚胎回收 胚胎检查 胚胎移植 1）供受体的选择与管理 供体的选择 遗传价值：生产性能优秀的母畜 健康状况:身体健康，营养水平中等以上的未孕动物 繁殖性能：达到配种年龄以上繁殖机能正常的母畜 受体的选择 身体健康，身体状况中上的适繁未孕个体，无生殖道疾病和难产病史 繁殖状况正常，有正常的发情周期 母性良好：泌乳性能、护仔性能 供、受体的管理 防疫、记录 饲养管理等 2）同期发情（synchronization of eatrus） 采用激素或类激素的药物处理，使这一群母畜在特定时间内集中发情和排卵 即将母畜的黄体期延长或缩短，使母畜摆脱内、外孕激素对卵巢的控制，在同一时间内引起全部母畜的卵泡发育，从而达到同期发情的目的 延长黄体期：孕激素 控制卵泡的生长发育和发情表现 缩短黄体期：前列腺素 加速黄体退化，使卵巢提前摆脱体内孕激素的控制 促进卵泡发育、排卵：促性腺激素 3）超数排卵 超排：以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力的卵子 孕母马促性腺激素、促卵泡素、前列腺素、促排卵类药物、孕激素 超数排卵处理的时期应选择在发情周期的后期，即黄体消退时期 个体对超排处理的反应效果难以预测 产生不良的后果：胚胎死亡 卵母细胞蛋白质合成过程发生改变 生殖道机能产生影响 4）胚胎回收 利用冲胚液从供体的生殖道中冲洗出来，提供移植或其它胚胎工程用 手术法 非手术法 胚胎质量评价： 透明带的形态和完整性 胚胎的发育与胚龄是否一致