6月9日講義分.pptVIP

* * * * * * * * * * * 薬品分析学３ 宿題(締切: 5/28分; 田中の部屋前のカゴ) 以下の化合物がサイズ排除クロマトグラフィーから溶出してく る順を答えなさい。 NaCl ショ糖 リゾチーム 2 答 1) リゾチーム, 2) ショ糖, 3) NaCl 演習 以下の化合物A, BのRf値を求めなさい。 3 吸い上 がった 溶媒の 先端 1.2 cm 3.6 cm 2.8 cm A B 演習 以下の化合物A, BのRf値を求めなさい。 3 吸い上 がった 溶媒の 先端 1.2 cm 3.6 cm 2.8 cm A B A: Rf値 = 2.8/3.6 =7/9 B: Rf値 = 1.2/3.6 =1/3 宿題(締切: 6/5; 田中の部屋前のカゴ) 以下の化合物のRf値を求めなさい。 4 ある化合物が順相系TLC上で上に上がりすぎた。TLC上の位置 を下げるためにはどうすれば良いか。 5 吸い上 がった 溶媒の 先端 1.0 cm 2.8 cm 3.0 cm 3.2 cm 4.0 cm 宿題(締切: 6/5; 田中の部屋前のカゴ) 以下の化合物のRf値を求めなさい。 4 吸い上 がった 溶媒の 先端 1.0 cm 2.8 cm 3.0 cm 3.2 cm 4.0 cm 左: Rf値 = (3.0?1.0)/(4.0?1.0) = 2.0/3.0 =2/3 宿題(締切: 6/5; 田中の部屋前のカゴ) ある化合物が順相系TLC上で上に上がりすぎた。TLC上の位置 を下げるためにはどうすれば良いか。 5 化合物の極性 ↑ 順相系TLC Rf値 ↓ 逆相系TLC Rf値 ↑ 展開溶媒の極性 ↑ Rf値 ↑ Rf値 ↓ 分析対象の化合物は変えられない 上記の表から展開溶媒の極性を下げればRf値が下がる。 展開溶媒の極性 ↑ Rf値 ↑ 高速液体クロマトグラフィー (HPLC) High Performance Liquid Chromatography: HPLC 高速液体クロマトグラフィー 装置構成 圧力計 インジェクター 高速液体クロマトグラフィー (HPLC)：構成 移動相：液体(有機溶媒または水溶液) ポンプ：移動相液体を加圧して高速で流す装置 検出器：カラムから溶出した化合物のリアルタイム検出の場 カラム：充填剤(固定相(担体))を充填された化合物分離の場 分離モード: 吸着、分配、イオン交換、サイズ排除、 　 　 アフィニティ 溶出順による分類: 逆相、順相 記録計：検出された信号強度の記録装置 移動相組成制御装置（後述） チャ?トレコーダー (chart recorder) 高速液体クロマトグラフィー (HPLC)：構成 検出器：カラムから溶出した化合物のリアルタイム検出の場 紫外可視吸光光度検出器: 紫外光?可視光を吸収する化合物 (= 紫外可視領域に吸収帯を有する化合物) 示差屈折計: 紫外可視領域に吸収帯がない化合物 蛍光検出器: (紫外可視領域に)蛍光を有する化合物 電気化学検出器: 酸化還元を受けやすい化合物 質量分析計: 溶出化合物の質量がわかる検出法 LC/MS (Liquid Chromatography/Mass-Spectrometry) その他の検出法: 放射性核種検出器、NMR、赤外吸収(IR)等 宿題(締切: 6/5; 田中の部屋前のカゴ) ある化合物が順相系TLC上で上に上がりすぎた。TLC上の位置 を下げるためにはどうすれば良いか。 5 化合物の極性 ↑ 順相系TLC Rf値 ↓ 逆相系TLC Rf値 ↑ 展開溶媒の極性 ↑ Rf値 ↑ Rf値 ↓ 分析対象の化合物は変えられない 上記の表から展開溶媒の極性を下げればRf値が下がる。 どうやって実現する？ 高速液体クロマトグラフィー (HPLC) High Performance Liquid Chromatography: HPLC 高速液体クロマトグラフィー 装置構成 圧力計 インジェクター 移動相組成 制御装置 A B 混合比 (高極性) 10 3 : 移動相組成制御(グラジエント) 装置移動相組成制御方法 グラジエント (gradient): 勾配 = 溶媒組成の濃度変化 極性や塩濃度(イオン強度)の異なる２種類以上の溶媒の 混合比を変化させる 順相クロマトグラフィー (例: 固定相がシリカゲル) ヘキサン (低極性) 酢酸エチル (高極性) 混合比 (低極性) 10 1 : 混合比 (高極性) 10 3 : 極性が上がって、より高極性化合物の溶離を促進する 移動相組成制御(グラジエント) グラジエント (gradient): 勾配 = 溶媒組成の濃度変化 = グラジエント (gra