第三章色层分离分解.ppt

(1) 分辨率 分辨率Rs的定义: 相邻两个带的峰位体积之差和它们的平均基线带宽之比. 表征两组分在色层过程中的分离程度. 分辨率影响因素 可以假设相邻两个溶质带的理论塔板数相等, 均为N, 可导得Rs的公式: K2’为第2个峰的分配系数, α 分离系数. 上式中三个影响是相互独立的 第1个因子表明, Rs与N1/2成正比, 因此增加柱长L, 使理论塔板数N增加, 可以提高分辨率Rs. 第2个因子是分离系数α的影响. 当α从1.05增到1.10时, Rs可提高近一 倍, 因此提高分离系数是提高分辨率的有效办法. 第3个因子表示分配系数k’的影响．k’增大, Rs增大, 但k’过大, 溶质难被洗脱, 因此最佳k’值一般在1-5范围. 实际上当k’接近最佳时, Rs随k’变化不大. 改变k’值的方法 按一定的程序改变温度, 称程序变温法,主要用于气相色层. 改变洗脱液组成, 在液相色层中应用广泛. 该方法可使k’相差近千倍的组分得到满意的分离. 改变洗脱液组成的方法有梯度洗脱和分步洗脱2种. a. 梯度洗脱 洗脱时利用专门设计的装置, 使洗脱液的组成按一定的程序随时间连续变化, 让各种组分都在合适的k’范围内被洗脱下来, 又称溶剂程序法. b. 分步洗脱