食管鳞状细胞癌患者再生因子Ⅰα表达的临床意义.pfg.docVIP

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目  录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文食管鳞状细胞癌患者再生因子10【表达的临床意义 前言……………… ………“一“…………一”…“…一 ”…“一一……“?8 材料与方法……………………………………………………………8 结果……?????……………?????????????O  O  O  O  O O…???…?…??…???-14 附图……………………………………?????……………???………???17 附表………………………………………………………………… 讨论…?????……?………????????????…?…0  0  0  0  0 0………………??23 结j沦………?…????????…?????…??……………???…??0  0  0  0  0  0… 参考文献…0  D  O  O  O  O……………………………………………………………27 综述再生因子10【的研究进展……………………………………………31 致谓}…………………??????…………………??????????……??????????45 个人简历…………………………………………………………………46 { 中文摘要 食管鳞状细胞癌患者再生因子I a表达的临床意义 摘  要 目的:食管癌是严重威胁人类健康及生命的恶性肿瘤之一。我国是食 管癌高发区,食管癌的发病率居世界第一位。目前食管癌的早期诊断水平 仍欠理想,大部分患者发现时己到中晚期。当今治疗食管癌的方法主要是 外科手术结合放、化疗的综合治疗,但食管癌治疗效果仍不理想,5年生 存率低于30%。如何早期发现食管癌,及尽早控制食管癌癌前病变的发展, 提高生存率,延长食管癌患者生存时间,一直是医疗工作者关注的课题之 一。再生因子Ia(Regeneration gene IQ,Reg Ia)属于一种钙依赖性植物血 凝素家族(c型植物血凝素家族),它是一组分泌蛋白,其功能相当于急 性反应蛋白,抗凋亡因子或胰腺p细胞和神经细胞分泌的生长因子,多种 功能与肿瘤的发生、发展、转移关系密切。本实验应用定量聚合酶链反应、 免疫组织化学和ELSIA的方法探讨RegIa在正常食管黏膜和食管鳞癌组 织中的表达差异,与临床病理学特征的关系及手术前后患者体内Reg Ia 的表达水平的变化。意义在于研究RegIa在食管癌病人中的表达情况,探 讨其表达的临床意义。 方法:(1)食管癌组织标本共30例,来自河北省人民医院胸外科、河 北医科大学第四医院胸外科,2008年lO月-12月的食管癌手术标本(病 理证实均为鳞状细胞癌),病理诊断为正常的食管黏膜20例作为正常组 织对照,取自食管癌组织手术远端5cm。应用半定量聚合酶链反应(Reverse transcriptase  polymemse  chain reaction,RT—PCR)、免疫组织化学和 ELSIA的方法检测Reg 10【的表达。 应用RT—PCR的方法检测ReglamRNA的表达,首先提取食管癌和食 管正常黏膜组织的总RNA,普通琼脂糖凝胶电泳测定RNA的完整性。按 RT—PCR试剂盒说明制备cDNA,配置209lPCR反应体系,加入自lOOng eDNA样本及合成引物进行扩增,应用凝胶成像仪上扫描记录各特异性 DNA扩增片段灰度,比较目的基因与内参基因GAPDH的扩增片段灰度, 用其比值作为mRNA表达水平的相对参数。 应用免疫组织化学的方法检测Reglot蛋白在食管癌组织中的表达;根 中文摘要 据0…一3+的评分标准:O…不显色或少于10%的肿瘤细胞浆呈现任何水 平的阳性染色;1+…一超过10%的肿瘤细胞浆呈现微弱染色,或在部分细 胞浆上染色;2+-…超过10%的肿瘤细胞浆全部弱染色;3卜…超过10% 的肿瘤细胞浆全部呈现强染色。 (2)患者血液标本来源:30例食管癌手术病人术前1天和术后7天采新 鲜血,经离心获得血清;20个健康员献血员血清作为正常对照。. 应用ELSIA方法分析食管癌患者血液中RegIa的表达,结果判断:每 个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值,按标准品浓度及吸光度做 出标准曲线,根据各待测样品吸光度在标准曲线上的位置读出相应浓度。 统计学方法:应用SPSS 1 3.0统计学软件对所有数据进行t检验、)c2检验 或秩和检验分析,计算P值,以P值<o.05判断差异有统计学意义。 结果:

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