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三色堇叶片DNA不同提取方法比较 摘要：以三色堇（Viola tricolor L.）叶片为材料，采用SDS法、CTAB法及改良CTAB法分别对三色堇叶片DNA进行了提取，并用琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱对DNA提取质量和浓度进行检测。结果表明，改良CTAB法提取的DNA纯度最高，提取效率较高;SDS法提取的DNA含有较多的蛋白质或糖类杂质;CTAB法虽然能够除去蛋白质等杂质，但是DNA浓度低于改良CTAB法。 关键词：三色堇（Viola tricolor L.）;叶片;产率;纯度 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）20-4999-03 DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2014.20.063 DNA Extracting from Viola tricolor L. Leaves SHANG Xiao， WANG Jian，GONG Sheng，ZHANG Ke，SUN Hai-yan （Key Laboratory of Protection， Development and Μtilization of Tropical Crop Germplasm Resources of Ministry of Education/College of Horticulture and Landscape， Hainan Μniversity， Haikou 570228，China） Abstract： High-quality DNA sample is important for plant molecular study. DNA was extracted from Viola tricolor L. leaves with SDS， CTAB and modified CTAB. The quality and concentration of extracted DNA was detected by agarose gel electrophoresis and ultraviolet spectrum. The results showed that the purity of DNA extracted with modified CTAB method was the best. DNA extracted with SDS method contained more impurities including protein or carbohydrate. Although CTAB method removed proteins， DNA concentration was lower than that with the modified CTAB method. The modified CTAB method was an appropriate， rapid and practical way for extracting DNA from Viola tricolor L. leaves. Key words： Viola tricolor L.; leaves; productivity;purity 三色堇（Viola tricolor L.）属堇菜科（Violaceae）堇菜属（Viola），又称猫脸花、猫儿脸、鬼脸花，原产于欧洲，为一二年生花卉，性喜温凉，我国各地均有栽培。三色堇品种繁多，色彩鲜艳，花期长且耐寒，有“花坛皇后”的美誉，深受人们喜爱[1]。三色堇的花色丰富多彩，有白色、黄色、粉红色、红色、淡紫色、紫色、杏黄色和橙色等;单朵花有纯色花和复色花两类，花瓣还常带有条纹、花斑、花边等。三色堇是我国重要的花坛和盆栽花卉，且市场需求量大，国内外关于三色堇的研究主要集中于其引种栽培研究和杂交育种工作上[2]。自18世纪40年代培育出具色斑的类型以来，三色堇的育种工作也得到了发展，但是关于其分子生物学方面的研究还较少。 高质量的DNA是进行分子生物学研究的必要前提，SDS、CTAB法及其改良方法等是常用的植物DNA提取方法[3]。三色堇叶片DNA提取方法已有报道[4]，但是总体来看，提取过程比较繁琐，提取效率比较低，需时较长，尚不能满足快速大量提取DNA用于分子生物学研究的要求。本研究根据前期试验研究，以三色堇叶片为试验材料，研究了不同方法提取三色堇总DNA的提取效果，为三色堇分子水平研究提供技术支持。 1 材料与方法 1.1 试验材料 三色堇种植于自海南大学园艺园林基地，选用茎顶端新鲜嫩叶，立即投入液氮冷冻处理，然后放入-70 ℃冰箱待用。 1.2 方法 1.2.1 不同方法三色堇提取DNA 取备用的三色堇嫩叶