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* 附注: 应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,轻度溶血对本法无影响,但是明显溶血可使测定结果偏低。血液标本和标准液应避免阳光直照,防止胆红素的光氧化。胆红素对光的敏感度与温度有关,血标本应避光置冰箱保存。标本保存冰箱可稳定3天,-70℃暗处保存可稳定3个月。 * 前白蛋白(P-ALB)测定 由肝细胞合成,在电泳分离中(PH8.6)移速比白蛋白快,半寿期很短,仅12小时。除可作为组织修补的材料,还是一种运载蛋白,可以和T3、T4结合,还可以和视黄醇结合而具有运载维生素A的作用。 * 检测原理:血清中的PA与抗PA抗体在液相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈现浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血清中PA(抗原)的含量成正比,利用散射比浊或透射比浊技术,与同样处理的PA标准比较,求得样品中PA 含量。 参考值:散射比浊法:22 ~ 40 mg/dL * 临床意义: ①诊断和监测营养不良:血清P-ALB在无感染的情况下,是儿童营养不良的灵敏指标。 ②诊断肝病:在肝炎早期,其浓度下降往往早于其他血清蛋白成分的改变。有研究表明,动态随访测定血清P-ALB对重型肝炎预后有较大的参考价值。 P-ALB明显上升,往往预后良好, P-ALB持久下降,预后险恶。 ③是一种负性急性时相反应蛋白,急性时相反应时下降。 ④有研究表明, P-ALB可以作为癌症的筛 选指标。 * 附注: 血清蛋白质的浓度用“g/L” 表示,因为血清中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以不能用mol/L 表示。 本法属浊度反应,试剂有任何可见的混浊,应弃去不用,否则对结果有较大影响。 血清标本如不能及时测定,应置2~8 ℃冰箱保存,可稳定2天。 * 碱性磷酸酶(ALP)的测定 一组在pH 9~10.5的碱性环境中能催化有机磷酸酯水解的酶。血清ALP主要来源于肝脏、骨骼,少部分来自小肠和妊娠期胎盘组织。肝细胞产生的ALP一般从胆道排入小肠。 * 测定方法(酶动力法):以磷酸对硝基酚为底物,2-氨基-2-甲基丙醇为缓冲液对硝基酚磷酸盐在ALP的作用下产对硝基酚和磷酸盐,在405nm除检测对硝基酚的吸收峰,计算出血清中的浓度。 参考值:1 ~12 岁 500 U/L; 12 ~15 岁 750 U/L; 25 岁以上 40 ~150 U/L。 * 临床意义: ①生理性增高:妊娠3个月 即可产生ALP 9个月 到达高峰(可为同龄妇女的3-4倍) 分娩后1个月 恢复正常 新生儿、儿童、青少年骨骼生长期比成人要高 1~5岁 (第一个高峰)是成人的2~3倍 10~18岁 (第二个高峰)是成人的4~5倍 ②肝胆管梗阻:ALP升高。(ALP分布在肝细胞的血窦侧和毛细胆 管侧的微绒 毛上,经胆汁排入小肠。 梗阻性黄疸时,由于肝内、外梗阻胆 汁排出不畅,再加上胆汁具有表面活 性剂作用可洗脱ALP返流入血,使血 中浓度升高) * ③肝炎或肝硬化:可轻度升高,但很少超 过上 限3倍 ④原发或继发性肝癌:明显升高。 (肿瘤组织或炎症刺激肝细胞产生ALP) ⑤骨骼系统疾病:可有不同程度的升高 (骨折恢复 期、佝偻病转移性骨肿瘤) ⑥其他疾病:甲亢、肢端肥大症等可轻度 升高 * 附注: 血清置室温 25 ℃ ALP活性显示轻度升高。例如室温6 h ,酶活性约增高1% ,置1-4天,酶活性增高3%-6% 。血清贮存冰箱 4 ℃ 酶活性亦出现缓慢地升高。冰冻血清ALP 活性降低,但当血清复温后,酶活性会慢慢恢复。质控血清或冻干质控血清亦呈现类似的ALP 活性升高现象 一般用血清或肝素抗凝血浆测定 ALP 活性。抗凝剂如草酸盐、柠檬酸盐和EDTA·Na2 能抑制ALP 的活性,不能使用这类抗凝剂的血浆做ALP的活性测定 ALP 活性与血清在反应液中所占体积分数有关。已发现当血清体积分数从1/26 降低到1/51时,所 测出的酶活性随之增高;但低于1/51 后,酶 活性没有进一步增加。这一效应的原因还 不清楚,可能是因为在高稀释度下ALP 多 聚体解聚所致 * γ-谷氨酰转肽酶的测定 γ-谷氨酰转肽酶是在氨基酸吸收中,参与γ-谷氨基循环的一个重要的酶。血清中GGT主要来自肝脏,少量来自肾脏、胰腺。 GGT在肝脏中主要由肝细胞的线粒体产生,90%为膜结合型。 * 测定原理: 以γ-谷氨酸-3-羧基-4-对硝基苯胺和双甘肽为底物,GGT作用于γ-谷氨酸-3-羧基-4-对硝基苯胺和双甘肽产生γ-谷氨酸双甘肽和5-氨基-2-硝酸苯甲酸盐,在450nm处检测吸收峰,计算GGT的浓度。 γ-谷氨酸-3-羧基-4-对硝基苯胺 + 双甘肽 γ-谷氨酸双甘肽 + 5-氨基-2-硝酸苯甲酸盐 参考范围:男性:11U/L~50U/L 女性: 7U/L~32U/L GGT * 临床意义: ①生理性变化:新生儿至6个月以内
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