培训课件-第二章生物化学检验中的诊断酶学.pptVIP

（一）测定碱性磷酸酶 ALP的测定方法有多种，磷酸苯二钠比色法（King-Amstrong法）曾在我国应用较广。目前国内应用较多的方法为中华医学会推荐法。 （二）临床意义 临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病等的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于原因不明的高ALP血液水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。应注意在骨生长、妊娠、成长、成熟和脂肪餐后分泌等生理情况下，ALP活性也可增高。 ALP和骨化过程密切相关，很多骨骼疾病，如变形性骨炎（Paget病）、副甲状旁腺功能亢进、佝偻病、软骨症、原发性和继发性骨肿瘤、骨折和肢端肥大症的患者血中ALP都可升高，尤其是骨ALP同工酶增高。急性肝炎包括病毒性肝炎和中毒性肝炎，ALP增高达2 ULN～5ULN，而肝硬化、胆石症和肿瘤引起的胆汁淤积，ALP增高达ULN的5～20倍。 90%以上的肝外胆道阻塞患者血液ALP升高，升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。如果血液中ALP持续低值，则阻塞性黄疸的可能性很小。若血液胆红素逐渐升高，而ALP不断下降表示病情恶化。肝外阻塞性黄疸、转移性肝癌、肝脓肿和胆石症时胆汁ALP检出率很高，并伴有肝ALP增加，而肝内胆汁淤积、急性肝炎、原发性肝癌等主要表现为肝ALP增多，大多数不出现胆汁ALP。 七、酸性磷酸酶及其同工酶 酸性磷酸酶（Acid phosphatase,ACP）是一组作用类似ALP的磷酸酶，不同点是最适pH偏酸，从pH4.5～7.0。它几乎存在于体内所有细胞中，如前列腺、红细胞、血小板、肾脏、肝脏、脾脏、胃、肌肉及骨髓等，以前列腺含量最多。 正常男性血液中ACP 约有1/3和1/2来自前列腺，其余部分和女性血中ACP可能来自血小板或破骨细胞。ACP同工酶分前列腺ACP（PAP）和非前列腺ACP（如红细胞ACP、溶酶体ACP、破骨细胞或吞噬细胞ACP等）两大类。 （一）测定方法 ACP的测定底物、原理和方法与ALP 相似，只是反应pH为酸性。如利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定ACP。 国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法，因为前列腺ACP对此底物亲合力高，测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。 此外还可通过用L-酒石酸这类抑制剂鉴别和估量PAP活性。由于ACP不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定ACP特别是PAP。 （二）临床意义 总ACP升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。前列腺癌时血液ACP活性显著升高，转移性癌患者可达40～50ULN。急性尿潴留、变形性骨炎、癌肿骨转移及甲亢时ACP可轻度升高。前列腺癌患者血液PAP也明显增高，其中肿瘤分化较好者增高尤为显著。 此外，慢性粒细胞性白血病PAP增高，而高雪病、尼曼匹克病、网状内皮细胞白血病或毛细胞性白血病均为非PAP增高。是否为抗酒石酸盐的非PAP增高为毛细胞性白血病的重要鉴别要点。 八、淀粉酶酶及其同工酶的测定 α-淀粉酶（α-Amylase，AMY或AMS）即1，4-α-D-葡萄糖4-葡聚糖水解酶，作用于α-1，4糖苷键，是一种钙依赖性金属蛋白酶，卤素和其他阴离子有激活作用。主要存在于胰腺和唾液腺中。 AMY有两种同工酶，即唾液型（S-AMY）和胰腺型（P-AMY），又可以分为多种亚型，S1、S2、S3、S4、和P1、P2、P3，淀粉酶分子量小，可以从肾小球滤过出现在尿液中。有时淀粉酶与抗淀粉酶自身抗体形成高分子复合物，称为巨型淀粉酶。 （一）测定方法 AMY活性测定方法可分为粘度测量法、比浊法、碘量法、糖化法和染料释放法5种。目前国内外临床实验室应用较多的是以麦芽多糖为底物的方法，如2-氯-对硝基苯麦芽三糖苷（CNP-G3）和亚乙基封闭的对硝基苯麦芽庚糖苷（4NP-G7）法（亦称EPS 法），以后者最常用，也是IFCC的推荐方法。 （二）临床意义 临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎，此酶常在腹痛后2～3h 开始升高（也有延至12h后升高者），多在12～24h 达峰值，2～5d下降至正常。峰值一般为4ULN～6ULN，最高可达40倍。此值的高低和疾病预后关系不大，但此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大，约在3～4天内AMY活性恢复正常。如持续性升高达数周，常提示胰腺炎有反复，或有并发症发生。尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降也比血液AMY慢，因此在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。 唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但临床上不难鉴别，且主要为S-AMY升高，有别于胰腺炎以P-AMY升高为主。进一步测定AMY同工酶，发现在腮腺、骨骼肌、输卵管、子宫、胃和肺内并无P-AMY，只含S-AMY，而胰腺和睾丸内无S-AMY，只含P-AMY。因此，上述组织损伤时，血液中必然