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第 二 章核酸的结构与功能 目 录 第一节 遗传物质的证明 第二节 DNA的一级结构 第三节 DNA的二级结构 第四节 DNA二级结构的多样性 第五节 DNA的高级结构 第六节 DNA的变性、复性及杂交 第七节 DNA的超螺旋和拓扑异构现象 第八节 RNA的结构与功能 第一节 遗传物质的证明 1。肺炎双球菌转化实验 2。噬菌体感染实验 3。DNA直接转化实验 实验二、 噬菌体感染实验(1952) 第二节 DNA的一级结构 一、核酸的化学组成 磷酸 戊糖 碱基 第三节 DNA的二级结构 DNA二级结构特点 1)主链:脱氧核糖和磷酸基通过3’,5’磷酸二酯键交互连接,形成螺旋链的骨架。两条主链以反向平行的方式组成双螺旋。主链处于螺旋的外侧,碱基位于内侧,双链的碱基之间以氢键相结合。氢键维持 DNA 双链横向稳定性,碱基堆积力维持双链纵向稳定性 2)碱基对: 碱基互补配对原则,A ? T; G? C 3)螺距: DNA 是右手螺旋结构,螺旋直径为20A,螺距为34A。碱基平面垂直螺旋轴,相邻碱基平面距离为 3.4A,螺旋一圈包含 10 对碱基。两个核苷酸之间的夹角为36°。 4)大沟和小沟:大沟对于在遗传上有重要功能的蛋白质识别DNA双螺旋结构上的特定信息是非常重要的。 稳定双螺旋结构的力 (1)碱基堆集力 是层层堆集的芳香族碱基上N原子 电子云交错而形成的一种力,使双螺旋结构内部 形成一个强大的疏水区,与介质中的水分子隔开, 有利于互补碱基间形成氢键,稳定双螺旋结构。 (2)氢键 互补碱基对之间可形成氢键。DNA外侧的氧 与介质中的水或蛋白质上的-OH形成。 (3)磷酸基静电斥力 磷酸基团上的负电荷与介质中的阳 离子之间形成离子键,减少双链间的静电排斥力。 第四节 DNA二级结构的多样性 DNA的高级结构 DNA的不寻常的结构 交替的嘧啶、嘌呤重复序列 - 倾向形成Z-DNA 反向重复序列 - 倾向形成十字形结构 镜像重复的同型嘧啶或嘌呤 – 可能形成三链结构 富含G的序列 -可能形成四链结构 (二)三链DNA (一)Holliday结构 概念: 三链DNA是由三条脱氧核苷酸链按一定的规律绕成的螺旋状结构。 结构:是在Watson-Crick双螺旋基础上形成的,其中大沟中容纳第三条链形成三股螺旋。在三螺旋DNA中三各个碱基配对(Hoogsteen base pairing)形成三碱基体: T-A-T ,C-G-C。 作用:可能与基因的表达调控有关。 人、其它脊椎动物的端粒重复单位:AGGTT 纤毛原生动物四膜虫的端粒: GGGGTT(TT) 面包酵母的端粒重复单位:G1-8T or G1-8A 共同点:富含G, 长度可达几百到几千碱基对 端粒 端粒酶 端粒酶在肿瘤中的检出率很高 85%的人肿瘤中发现了端粒酶活性的表达,而正常组织或良性病变仅为4%左右 端粒酶活性的高低与肿瘤分化的程度有关: 小细胞肺癌(100%),胰腺癌(95%),膀胱癌(92%),肝癌(86%) 79%:一期肿瘤 84%:二期肿瘤 87.5%:原位瘤 随着研究的深入,端粒酶将为多种疾病的诊断与治疗提供快捷、特异、副作用小的检测新途径。 第五节 DNA的变性、复性及杂交 热变性 解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。 第六节 真核生物的染色体 染色质的基本结构;串珠模型: 1、核小体: 由H2A、H2B、H3、和H4四种组蛋白各以两个分子组成的八聚体和盘绕其表面的DNA双螺旋组成。 2、连接丝:DNA双链 3、组蛋白H1 染色体的结构模型 一级结构:核小体,直径10nm。 二级结构:螺线体,直径30nm。 三级结构:超螺线体,直径400nm。 四级结构:染色体,直径1000nm. 染色质的两种类型 异染色质:染色质线中染色很深的区段,为高度螺旋化而卷缩,在遗传行为上表现为隋性,一般不编码蛋白质。 常染色质:染色很浅的区段,为解螺旋状态,在遗传行为上表现为活性, ★ tRNA的命名:tRNAgly; tRNAimet; 1、 tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基, 3′末端为 -CCA-OH 5′末端大多数为G 4、 tRNA的功能:结合活化氨基酸(3′-CCA-OH ),搬运氨基酸到核糖体;识别mRNA密码子。参与蛋白质的翻译。 本章 重点 1. DNA
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