白首乌多糖抗疲劳及耐缺氧、耐高温作用研究.docVIP

白首乌多糖抗疲劳及耐缺氧、耐高温作用研究 　　摘　要　目的　探讨白首乌粗多糖对小白鼠的抗疲劳及耐缺氧、耐高温能力的影响。方法　从白首乌（耳叶牛皮消）中提取粗多糖，将动物随机分为4组，每组10只，分别为对照组，高、中、低剂量组，连续给小鼠灌胃8　d后，观察不同剂量对小鼠负荷游泳时间、耐缺氧时间、耐高温时间的影响。结果　白首乌粗多糖能显著地延长小鼠负荷游泳时间、耐缺氧时间及耐高温时间。结论　白首乌粗多糖对小白鼠抗疲劳及耐缺氧、耐高温能力具有明显的作用。 　　关键词　白首乌；多糖；抗疲劳；耐缺氧；耐高温 　　中图分类号　R2855 文献标识码　A 文章编号2012 　　白首乌（Cynanchum　auriculatum　Royle　ex　Wight）系萝摩科（Asclepiadaceae）马利筋亚科（Asclepioideae）鹅绒藤属（Cynanchum　linn）植物，又名耳叶牛皮消、飞来鹤（《植物名实图考》）、老牛冻（湖南，四川［1］）．在我国资源丰富，山东、江苏等地有人工栽培，其块根药用，具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效［12］．白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的作用［34］．研究表明，白首乌具有养血益肝、固肾益精、乌须黑发和延年益寿的功效［2，5］．现代研究发现白首乌中含有多种有效成分，具有抗肿瘤、保肝护肝降血脂等多方面的药理活性［68］．国外的研究也证实了这些药理活性［910］． 1　材料和试剂 　　1.1　实验动物 　　昆明种雄性和雌性小鼠各半（120只，体重（20±2）　g），湖南农业大学动物饲养基地提供． 　　1.2　实验试剂与设备 　　实验所用试剂与设备的名称、厂商及型号见表1． 　　1.3　实验数据处理软件 　　对所有实验数据进行统计学处理，以均数±标准差（±s）表示，用t检验来分析组间差异的显著性． 　　2　实验方法 　　2.1　多糖的提取分离 　　2.1.1　前处理　取白首乌饮片，使用植物粉碎机将其粉碎，得到白色白首乌粉末．将所得白首乌粉末装入圆底烧瓶，按料液体积比1∶　3加入85%无水乙醇，90　℃水浴加热1　h，提取2次，过滤，将所得滤渣风干，得到黄色干粉． 　　2.1.2　提取　称取适量上述白首乌黄色干粉，置于圆底烧瓶中，按料水质量比1∶　20加入蒸馏水，在100　℃的热水浴中冷凝回流浸提2　h．冷却后使用离心机3　000　r/min离心10　min，将所得上清液合并．将上清液倒入圆底烧瓶，于90　℃温度下使用旋转蒸发仪浓缩．浓缩所得试液加入3倍体积95%乙醇溶液，静置1　h　后，使用离心机3　000　r/min离心10　min，弃去溶液，将沉淀抽滤．抽滤所得沉淀干燥后即得白首乌粗多糖． 　　2.2　药理实验 　　2.2.1　动物分组　120只小白鼠，分为三大组，高剂量组，剂量为150　μg/g；中剂量组，剂量为100　μg/g；低剂量组，剂量为50　μg/g．给药方式为灌胃给药．每一大组小白鼠40只，雌雄各半，体重（20±2）　g．并将小白鼠随机分为对照组和3个实验组，每组10只，实验组按剂量用生理盐水稀释，白首乌粗多糖按25　μL/g量给药；对照组按等量生理盐水灌胃．此4组连续灌胃8　d，于末次灌胃2　h后进行实验． 　　2.2.2　负荷游泳实验　小白鼠40只，雌雄各半，随机均分4组，每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8　d，实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖，以25　μL/g灌胃，1次/d；对照组按等量生理盐水灌胃．于完成灌胃的小白鼠尾部束一重物（约2　g）放入一水深20　cm，水温（30±1）　℃的玻璃缸内，以小鼠体力耗竭（小鼠头部沉入水中10　s不能浮出水面）为指标，记录小鼠生存时间． 　　2.2.3　耐缺氧实验　小白鼠40只，雌雄各半，随机均分4组，每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8　d.实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖，以25　μL/g灌胃，1次/d；对照组按等量生理盐水灌胃．将小鼠放入250　mL的广口瓶内，每瓶1鼠，瓶内装有10　g无水氯化钙，用凡士林涂抹瓶口，盖严密封，立即记时，以呼吸停止（小鼠胸部不起伏）为指标，记录小鼠存活时间． 　　2.2.4　耐高温实验　小白鼠40只，雌雄各半，随机均分4组，每组10只按高剂量组、中剂量组、低剂量组连续给小鼠灌胃8　d.实验组按剂量用生理盐水稀释白首乌粗多糖，以25　μL/g灌胃，1次/d；对照组按等量生理盐水灌胃将小鼠放入50±1　℃的恒温箱中的玻璃缸内，以小鼠呼吸停止（小鼠胸部不起伏）为指标，记录小鼠存活时间． 　　2.2.5　统计学处理　数据以均数±标准差（±s）表示，用