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微流控离心机基于逆流配置
微流控离心机基于逆流配置
摘要: 提出了一种微流体离心机没有移动部件,依靠一两涡之间形成逆流式液体流.离心机是由流速度0.6 - -2.6 m / s,导致应用于样品间的加速度达到50到2000g的液体流动离心腔和运输使用epi-fluorescence微粒的可视化显微镜和亮场与高速成像相机。发现小颗粒流-流动的线条,而大颗粒显示跨流迁移。大小不同的粒子分离实验证明,标明了吗随着气流速度的增加,粒子的漩涡越来越多的向外推动的。每个建筑,有角fuge适合处理小样本数量和可以集成芯片实验室系统。
关键词:离心机,涡流,微观粒子,大小分离
1介绍
小颗粒的分离和分离前缀的话在液体生物分析的一个关键操作化验。在这种背景下,这个词应该是“粒子”广义地理解,包括对象细胞、病毒或细菌。大量不同的技术可用于颗粒分离和分级,其中一些已经明显先进的通过利用微流控技术(最近的一个概述,请参阅(Lenshof和Laurell 2010))。一些最著名的微流体粒子分离方法基于双向电泳(Pethig 2010),畅通的电泳(Manz 2003;Fonslo2005) 场,流分离(吉丁斯考德威尔et al . 1966;1972),或侧向位移数组(黄et al . 2004年) 相比之下,尽管它的重要性分析协议离心分离方法尚未渗透芯片实验室技术大量。离心过程中经常使用药物,化学、生物学研究中在工业应用(梁1998;Regel和梁格雷厄姆Wilcox 2001;2001;2008)。主要用于造成分离或隔离在前缀固体和液体养老金,“固体”一词指的是不溶性化合物,所有类型的生物分子(科尔和汉森1999)或细胞(赵Alberts 2008;2008),和核酸(Marziali 2001)。另一个应用程序的分离混合物,密集的组件迁移距离离心机的中心。对于许多应用程序这是总理能够集中或重要性单独的小样本数量。和及其小型化,表示“状态”实验室芯片平台——离心分离技术形式将有助于达到这一目标(达里奥et al . 2000;Abarbanel和Kovalenko 1977)。
微流控技术应该成为可能没有移动部件,使设计微型离心机处理非常小的样本数量,然而堪比商用性能离心机。最重要的是,离心小型化技术将使生产成本低,一次性设备使用一次,然后扔掉,以防止样品污染
几次试图设计和制造微流体离心机没有移动部件均已完成(李et al . 2008;谢尔比et al . 2003;Lim et al . 2003年)。然而,我们所知的能力这样的微型离心机分离颗粒的不同尺寸或不同密度从来没有被证实令人信服地彻底和分析。在这个手稿我们首次展示的尺度依赖的分离微粒通过epi-fluorescence学习显微镜和高速摄像机成像。
另一种方法在微使用离心力流体是惯性微流体(迪卡罗2009)。在这里,惯性解除由于速度剖面,横渡英吉利海峡聚焦粒子在特定位置截面即使对粒子的浮力。在弯曲的通道离心力引起院长漩涡,把稳定位置和减少他们的数量。这可以结合与离心力由于密度不同颗粒和流体(萨利et al . 2009年)。这种方法不同于我们通常弯曲的事实渠道拥有较大的曲率半径,减少了离心力。
最后,广泛应用于离心微流体旋转的磁盘系统(Gorkin et al . 2010年)。在这样的系统惯性力产生自然,因为框架-参考巩膜的静止是一个加速离心和科里奥利力的框架存在。
我们现在的小型离心机,包含一个主室的大小不同的20 20 lm 9 20 9200 9 250 9 250 lm,连接两个巩膜在逆流操作的模式。的微型离心机芯片是由聚二甲基硅氧烷(PDMS)成型技术使用紫外线光刻SU-8抗拒。我们希望使用微型离心机芯片作为替代商业离心机将更容易处理与小样本册。此外,这些离心机可以集成与复杂的实验室芯片设置,允许执行不同的样品制备和分析步骤在一个平台。
2材料和方法
我们测试微型离心机的性能荧光显微镜和高速成像。测量是进行了使用两种不同的显微镜设置。epi-fluorescence测量,一个倒尼康Ti-S配备了荧光显微镜HG纤维照明器,一套三足过滤器FITC / Cy3 / Cy5,一个Optosplit-II分光镜(BFI Optilas),尼康相机DS-Qi1MC CCD相机,和109 CFI S-Fluor目标(WD 1.20毫米;钠1.20),见图S1的补充材料。高速测量,尼康是相同的配备了MotionPro-Y4 Ti-S显微镜CMOS高速相机(IDT成像解决方案GmbH)允许时速4000帧的数据采集第二(fps)完整的决议,请参阅图S2的柔软mentary材料。109年的目标是用于相同这两个实验。所有的实验都在执行室温(22 ? C)。使用了两种不同的液体,即。、纯净
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