肺炎双球菌转化实验的若干疑问和思考.docVIP

肺炎双球菌转化实验的若干疑问和思考 　　摘 要： 限于高中教材的编版，人教版的教科书对于肺炎双球菌的转化实验只是做了一些基础介绍，学生在学习时提出各种各样的疑问。作者发现学生提出的一些疑问很有意义和代表性，并就高中教材中的肺炎双球菌的转化实验的一些背景知识、常见疑问进行介绍，旨在帮助学生为该版块的学习构建较完整的知识体系。 　　关键词： 肺炎双球菌 转化实验 常见疑问 　　一、R型菌无荚膜无毒性，而S型菌有荚膜有毒性，荚膜和其毒性有什么联系？ 　　肺炎双球菌有具多糖荚膜的致病菌S型菌（Smooth，因菌落外观光滑）和非致病菌R型菌（Rough，因菌落外观粗糙）。荚膜由多糖构成，荚膜具有保护作用，除了具有抗干燥等功能外，还能使细菌抵抗吞噬作用和体液中的杀菌物质，从而使人或小家鼠致病（对人，它能导致肺炎；对小家鼠，则导致败血症）。但在加热到致死程度后，该类型的细菌便失去致病能力。相比较而言，S型肺炎双球菌更容易在小鼠体内存活并繁殖，从而使小鼠染病死亡，但R型肺炎双球菌因为不具备荚膜，在小鼠体内很容易被吞噬细胞吞噬或者被杀菌物质杀死，所以在小鼠体内不能存活。因此，不能认为荚膜是毒性物质才导致S型细菌有毒的，荚膜只是起保护作用。 　　二、R型菌和S型菌是不同类型肺炎双球菌，但都是寄身生活的，但是R型菌无毒性，容易被吞噬细胞吞噬或者被杀菌物质杀死，那么在平时它们是怎样生活的呢？ 　　R型菌和S型菌虽然在荚膜上有差异，但是二者属于同一个物种，R型菌不能合成荚膜的原因在于一个控制UDPG一脱氢酶的基因发生了突变，S型菌经过突变可以产生R型突变体，反之亦然。R型菌往往出现在人为培养的老龄化的菌群内，也就是说S型菌是野生型，而R型菌是突变型。 　　三、为什么可以确定是R型菌可以转化为S型菌，而不是R型菌又突变为S型菌或者原来的S型菌复活了呢？ 　　由于荚膜多糖的血清学特性不同、化学结构各异，S型又可分成许多不同的小类型，如SⅠ、SⅡ、SⅢ等，相对应的突变型为RⅠ、RⅡ、RⅢ。1928年，格里菲斯对肺炎球菌的致病情况做了研究。当他把热处理的S细菌（S-Ⅲ型）与活的R细菌（R-Ⅱ型）的混合物注射到小鼠中时，尽管这两种细菌本身都不是致死的，但是小鼠死亡了。更重要的是，从注射了这类混合物而死亡的小鼠身上分离得到S型菌，而且是与加热杀死的S细菌相同的S型（S-Ⅲ），而不是S-Ⅱ。虽然S型菌和R型菌可以相互突变，但是突变总是涉及丢失或获得产生一个特定类型荚膜的能力，如S-Ⅱ ? R- Ⅱ；而不是S-Ⅲ ? R-Ⅱ，即突变发生在同型的双球菌中。因此，这些S细菌不可能是通过这些特定的R细菌突变而来的。 　　1933年，阿洛维（Lionel J. Alloway）将R-Ⅱ型菌和S-Ⅲ型菌的无细胞提取液（所有完整细胞、细胞碎片、荚膜分子都通过离心和过滤从提取物中去掉）混合，培养皿上仍长出了S-Ⅲ型菌――这否认了R型菌以某种方式使加热杀死的S型菌“复活”。 　　四、高温加热后可以杀死细菌，为什么却杀不死DNA？ 　　实验加热温度是60度，对生物体而言，高温加热后，其蛋白质的空间结构遭到破坏而丧失生物活性，这种生物活性的丧失是不可逆的。加热引起蛋白质变性是导致S型细菌死亡的原因。DNA是由两条链形成的双螺旋结构，两条链间碱基通过氢键连接，加热会使氢键断裂，使DNA双螺旋解开成单链，称为DNA变性。但和蛋白质变性不同的是，当温度缓慢降低时单链又由于碱基互补配对作用可以重新形成双链，称为DNA复性。所以，加热杀死的S菌的DNA还是有作用的。 　　五、R型细菌是如何转化为S型细菌的？ 　　转化作用是指一种生物由于接受了另一种生物的遗传物质（DNA或RNA），而表现出后者的某些遗传性状或发生遗传性状改变的现象。转化的实质是外源DNA与受体细胞DNA之间的重组，使受体细胞获得新的遗传信息。因此，转化作用可以看做是广义上的基因重组。 　　转化在细菌中较普遍。两个菌种能否转化，与两种细菌的亲缘关系有关，转化一般只发生在同一物种或近缘物种之间，亲缘关系越近，转化就越容易。R型细菌在生长高峰期会出现局部细胞壁缺失现象，称为感受态。感受态的细菌能产生一些酶，催化转化的进行，只有处于感受态的细菌才能发生转化。发生转化时，S型细菌的DNA先以双链形式吸附于R型细菌表面的特定结合位点上，R型细菌会释放核酸内切酶将吸附的DNA降解为一些DNA片段（其中一些片段含有控制荚膜形成的基因），再依靠另一种核酸酶降解其中的一条单链。进入R型细菌体内的DNA单链片段与R型细菌的DNA上同源区段进行配对（因为无荚膜菌是有荚膜菌的突变体，所以很容易找到同源区段），切除并替换相应的单链片段，形成一个杂合DNA区段（它们间不一定互补，而是呈杂合状态）。可见转化后形成的S型细菌内含