第二章_发酵液的预处理和固液分离方法课件.ppt

第二章 发酵液的预处理和固液分离 预处理和固液分离内容 生物产品的分类（根据分离特点） 培养液产品：如饮料酒类，没有提取与精制，只需考虑除去固相杂志即可。 细胞产品：如活性干酵母，只需固液分离和洗涤可溶性杂志的过程。 粗制产品：如工业用酶制剂，只需考虑产品提取。 精制产品：有纯度要求，大多数生物产品属此类，其分离回收过程一般包括预处理和固液分离、提取、精制和成品加工四步。 精制产品分离纯化一般流程 胞内产品 2.1 发酵液预处理 2.1.1 引言 发酵液预处理的目的： 改变滤液的性质 除去部分可溶性杂质 尽可能使产物转入便于后处理的一相中（多数是液相） 预处理的方法 加水稀释法Dilution with water 加热法 Heating 调节悬浮液的pH值 Regulation of pH 凝聚和絮凝 Coagulation and flocculation 助滤剂Filter aids和反应剂 Reactant 高价无机离子的去除 Removal of inorganic ion 杂蛋白的去除 Removal of USELESS PROTEIN 2.1.2发酵液过滤性能的改变 生物悬浮液的特性： ①悬浮物颗粒小，比重与液相相差不大； ②固体粒子可压缩性大； ③粘度大，含有蛋白质、多糖等胶体物质，大多为非牛顿型流体。 改性的目的：降低滤饼比阻，提高过滤与分离的速率。 过滤 过滤介质：过滤采用的多孔物质； 滤浆：所处理的悬浮液； 滤液：通过多孔通道的液体； 滤饼或滤渣：被截留的固体物质 五 澄清过滤 当悬浮液通过滤层时，固体颗粒被阻拦或吸附在滤层的颗粒上，使滤液得以澄清，这种方法叫做澄清过滤。 适合于固体含量少于0.1%(V)、颗粒直径较小的悬浮液的过滤分离，多用于需要除菌的场合。 已知平板型过滤器操作时，通过滤饼的压力降与流速成正比： = （2-29） 式中l为滤饼厚度；μ为料液黏度；α为滤饼比阻；ρ0为单位体积料液中固体的质量。 对于篮式离心机： ① 滤饼不是平板而呈圆柱形，压力降随半径而变化，可用下式表示： = （2-30） ② 流体通过滤饼的流速也随半径而异，越接近鼓壁流速越小，可用下式表示： u = （2-31） 式中Q为滤液的体积流量，与位置无关，是常数；H为离心机的高度。 结合式(2-30)和式(2-31)，可得到： = （2-32） 将上式从Rc → R0积分，可以得到滤饼层的压力降： = （2-33） 在离心过滤中，造成压力降的推动力应该是施加在流体上的离心力： = （2-34） 结合式(2-33)和式(2-34)便可求得通过滤饼的流体流量： Q = （2-35） 体积流量Q并非常数，而是随着滤饼厚度的变化而变化，滤饼厚度增加则RC减小，Q也减小，并且Q和RC都是时间的函数。 在离心过滤的计算中，所需求的是给定体积料液的过滤时间，因此要将上述公式进行转换，可利用Q的定义以及固体的质量守恒公式来完成： Q = (2-36) = (2-37) 式中ρC为单位体积滤饼中固体的质量；ρ0为单位体积料液中所含固体的质量。 将式(2-36)和式(2-37)代入式(2-35)后积分可得过滤时间： t = （2-38） 该式是得到厚度为(R0-RC)的滤饼所需的过滤时间，常用于过滤操作的放大。 2.5.3 超离心法 根据物质的沉降系数、质量和形状不同，应用强大的离心力，将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法称为超离心法。 应用超离心技术中的差速离心、等密度梯度离心等方法，已经成功的分离制取各种亚细胞物质，如线粒体、微粒体、溶酶体、肿瘤病毒等。 超离心法是现代生物技术领域研究中不可缺少的实验室分析和制备手段。 用5×105g以上的强大离心力，长时间的离心(如17h以上)，可获得具有生物活性的DNA、各种与蛋白质合成有关的酶系、各种mRNA和tRNA等，这为遗传工程、酶工程的发展提供了必需基础。 一．超离心技术的原理 超离心技术中，由于