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安神补脑液制备工艺优化研究 　　[摘要] 目的 为了优化安神补脑复方制剂制备工艺，提高药效。 方法 正交实验法确定最佳醇沉工艺。结果 药液相对密度为1.20，含醇量为60%，静置时间24 h的醇沉效果最佳。结论 按优化工艺制得的制剂2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、淫羊藿苷含量和出膏率高，且质量稳定。 　　[关键词] 安神补脑液；正交设计；淫羊藿苷；制备工艺 　　[中图分类号] R461 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）10-0048-02 　　安神补脑液由鹿茸、制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草、大枣、维生素B1等7味药物制成，具有生精补髓、益气养血、强脑安神等功效。适用于肾精不足、气血两亏所致的头晕、乏力、健忘、失眠；神经衰弱症见上述证候者。是临床上常用的成方制剂。虽然《中国药典》2010版一部中收载了该制剂，但“制法”项下仅记载了将“滤液浓缩至适量，加3倍量乙醇，静置，滤过，滤液备用”[1]， 对于醇沉工艺并没有具体的方法，为细化复方工艺，提高复方的药效和生物利用度，现采用正交法对该复方的醇沉工艺进行考察及优化。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　Agilent 1100型液相色谱系统，包括：高压二元泵（G1311A），可变波长检测器（G1313A），Agilent 1100 series色谱工作站（美国安捷伦科技有限公司）。 　　1.2 对照品 　　淫羊藿苷对照品购自中检所，供含量测定用，纯度98%。 　　1.3 试剂 　　乙腈、甲醇均为色谱纯，乙醇为分析纯，购自天津科密欧化学试剂有限公司。 　　1.4 药材 　　制何首乌、淫羊藿、干姜、甘草和大枣等药材购自沈阳市药材市场，经鉴定均为正品。 　　2 方法与结果 　　2.1醇沉前提取液的制备 　　由于药典中未记载该制剂的处方量，根据部颁标准的记载[2]，按处方配比取处方中的制何首乌62.5 g，淫羊藿50 g，干姜 12.5 g，甘草 6.25 g，大枣 12.5 g，精密测定。加水煎煮3次，第1次2 h，第2、3次各1 h，合并煎液，滤过，滤液平均分成三份，分别减压浓缩至相对密度为1.15、1.20、1.25时备用。 　　2.2供试品溶液制备及色谱条件 　　通过组方分析，该复方醇沉部分的主要药味为何首乌和淫羊藿，因此，主要考察指标为出膏率、2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷（以下简称二苯乙烯苷）、淫羊藿苷。采用HPLC法对该复方的上述两个成分同时进行含量测定。 　　2.2.1供试品溶液的制备 将醇沉后的溶液滤过，加水定容至1000 mL摇匀，精密吸取1～10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。 　　2.2.2色谱条件 迪马DiamonsilTM C18色谱柱（4.5 mm×250 mm，5 μm）；乙腈-水为流动相， 梯度洗脱（0～10 min，乙腈体积分数为30%～50%；10～11 min，乙腈体积分数为50%～80%；11～15 min，乙腈体积分数为80%～100%；15～20 min，乙腈体积分数为100%）；流速为1.0 mL/min；检测波长为350 nm；柱温为30℃；进样量25 μL[3]。 　　2.3醇沉工艺的优化 　　采用L9（34）正交实验对醇沉条件中的密度、醇浓度及静置时间进行3种水平的考察，确定最佳醇沉方法。其影响因素水平见表1。 　　表1 醇沉工艺相关因素水平表 　　按L9（34）正交表安排进行试验。取上述不同相对密度的三份样品分别按正交表安排试验。以出膏率、淫羊藿苷、二苯乙烯苷三个指标进行考察，加权综合评分，其中总分100分，出膏率占20分，淫羊藿苷占40分、二苯乙烯苷占40分。正交分析与加权评分结果见表2、表3。 　　表2 醇沉条件考察实验结果 　　表3 方差分析表 　　注：F0.05（2，2）=19.00； F0.1（2，2）=9.00 　　直观分析和方差分析结果表明：三个考察因素中静止时间对结果影响最为显著，为主要影响因素；药液相对密度和含醇量对结果影响较小，为次要因素。最佳提取条件为A2B1C3，即药液相对密度为1.20，含醇量为60%，静止时间24 h。 　　2.4验证试验 　　称取何首乌（制）、淫羊藿、干姜、甘草、大枣，共3份，分别加水煎煮3次，第1次2个小时，第2、3次各1个小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，加入乙醇使含醇量达到60%，静止放置24 h后分别测定出膏率、二苯乙烯苷、淫羊藿苷的量，见表4。 　　表4 验证实验结果 　　3讨论 　　原提取工艺是将水提液浓缩至流浸膏，而流浸膏要求浓缩到每1 mL相当于原药材1 g，这对工业生